矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验

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1、品种名称：脑—心浸萃琼脂培养基　　英译名称：BrainHeartInfusionAgar　　品种编号：028361　　培养基规格：100g干燥培养基　　培养基用途：广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养，包括营养要求较高的微生物的培养，特别用于矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验。图册：　　脑—心浸萃琼脂培养基使用原理：　　胨和脑—心浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。　　脑—心浸萃琼脂培养基配方(每升)：　　幼牛脑(提取浸出粉)200g　　牛心(提取浸出粉)25

2、0g　　葡萄糖2g　　氯化钠5g　　月示胨10g　　磷酸氢二钠2.5g　　琼脂15g　　最终pH7.4±0.2　　脑—心浸萃琼脂培养基使用方法：　　1.称取脑—心浸萃琼脂培养基51g，加入1000mL蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管，121℃灭菌15分钟，做成斜面培养基。　　2.从滤膜上挑取典型菌落，接种到脑—心浸萃琼脂培养基斜面上，在35±0.5℃培养24—48h。　　3.挑取典型培养物到一片清洁的载玻上，加几滴新鲜的3%的过氧化氢到载玻片的涂抹菌液上，如果没有气泡发生，就显示过氧化氢酶反应为阴性，则菌落可视为粪

3、链球菌，就应该继续如下确证过程。如果有气泡发生，则过氧化氢酶反应为阳性，因此菌落不属于粪链球菌确证试验至此即可结束。　　4.以接种环从脑-心浸萃琼脂培养基上转移一典型菌落到脑-心浸萃液态培养基内，在45℃培养48h。此外也要同时转移一典型菌落到胆汁液态培养中，在35℃培养72h。这种培养基是以无菌的10%牛胆汁加入到60mL无菌的脑-心浸萃液态培养基中面配成。　　5.转移到上述培养之后，若是菌落能得到繁殖，则表示结果为阳性。　　6.计数结果。　　菌数/100mL=N/V×100　　N——经证实的粪性链球菌菌落数　　V——过滤的水样体

4、积(mL)　　脑—心浸萃琼脂培养基质量控制：　　质控菌株接种后于35±0.5℃培养24h，结果如下：　　菌名　　　　　　菌号　　　　　　生长状况　　粪性链球菌　　　　CMCC(B)32223　　良好　　乙型溶血性链球菌　CMCC(B)32210　　良好　　大肠埃希氏菌　　ATCC25922　　　　良好　　培养基贮存注意事项：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。