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时间:2019-03-06
《矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、品种名称:脑—心浸萃琼脂培养基 英译名称:BrainHeartInfusionAgar 品种编号:028361 培养基规格:100g干燥培养基 培养基用途:广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养,包括营养要求较高的微生物的培养,特别用于矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验。图册: 脑—心浸萃琼脂培养基使用原理: 胨和脑—心浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。 脑—心浸萃琼脂培养基配方(每升): 幼牛脑(提取浸出粉)200g 牛心(提取浸出粉)25
2、0g 葡萄糖2g 氯化钠5g 月示胨10g 磷酸氢二钠2.5g 琼脂15g 最终pH7.4±0.2 脑—心浸萃琼脂培养基使用方法: 1.称取脑—心浸萃琼脂培养基51g,加入1000mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,121℃灭菌15分钟,做成斜面培养基。 2.从滤膜上挑取典型菌落,接种到脑—心浸萃琼脂培养基斜面上,在35±0.5℃培养24—48h。 3.挑取典型培养物到一片清洁的载玻上,加几滴新鲜的3%的过氧化氢到载玻片的涂抹菌液上,如果没有气泡发生,就显示过氧化氢酶反应为阴性,则菌落可视为粪
3、链球菌,就应该继续如下确证过程。如果有气泡发生,则过氧化氢酶反应为阳性,因此菌落不属于粪链球菌确证试验至此即可结束。 4.以接种环从脑-心浸萃琼脂培养基上转移一典型菌落到脑-心浸萃液态培养基内,在45℃培养48h。此外也要同时转移一典型菌落到胆汁液态培养中,在35℃培养72h。这种培养基是以无菌的10%牛胆汁加入到60mL无菌的脑-心浸萃液态培养基中面配成。 5.转移到上述培养之后,若是菌落能得到繁殖,则表示结果为阳性。 6.计数结果。 菌数/100mL=N/V×100 N——经证实的粪性链球菌菌落数 V——过滤的水样体
4、积(mL) 脑—心浸萃琼脂培养基质量控制: 质控菌株接种后于35±0.5℃培养24h,结果如下: 菌名 菌号 生长状况 粪性链球菌 CMCC(B)32223 良好 乙型溶血性链球菌 CMCC(B)32210 良好 大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 培养基贮存注意事项:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
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