erkp38mapk信号转导通路在人脐动脉血管平滑肌细胞表型转化中的作用

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1、徐州医学院硕士学位论文ERK/P38MAPK信号转导通路在人脐动脉血管平滑肌细胞表型转化中的作用姓名：庞慧申请学位级别：硕士专业：内科学（心血管病）指导教师：夏勇;李东野20070401徐州医学院硕士擘住论文缩略词DM[EMEDlAfBsPDGF-BBPBSVSMCHASMCSMQ．actinHI己PSM．MHCNrIT缩略词表Abbreviation英文全称Dulbecoo’SModifiedEagleMediumethylendediamineteraaceficacidfctalbovinescl'unlplatel

2、et．-dcdvedgrowthfactor-BBphosphatebufferedsalinesolutionsvascularsmoothmusclecellhumanumbilicalarterysmoothmusclecellsmoothmusclealpha-actinhorseradishperoxidasesmoothmusclemyosinheavychain3-(4,5-dimethylthiazol-2·ryl)-2,5·，diphenyltetrazoliumbromidePolymerasechai

3、nreactionReversetranscriptionopticaldensitydiethylpyrocarbonateglyceraldehydephosphatedchydrogenase80diumdodecylsulfatepolyacrylamidegeleleetrophoresish-Caldesmoncalponinnitroccllulose中文全称细胞培养液乙二胺四乙酸胎牛血清血小板源性生长因子．BB磷酸盐缓冲液血管平滑肌细胞人脐动脉平滑肌细胞平滑肌0．肌动蛋白辣根过氧(化)物酶平滑肌肌球蛋白重链

4、四唑盐聚合酶链式反应逆转录光密度焦碳酸二乙脂磷酸甘油醛脱氢酶十二烷基硫酸钠聚丙酰凝胶电泳重链钙调蛋白结合蛋白调宁蛋白硝酸纤维素腿盯∞一哪一甜№徐耕医学院硕士学位论文本论文论文独创性声明我个人’”叫。券纨杉易。砟朋芬在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名：灶论文使用授权声明日期：趔Z生彭且本人完全了解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留

5、送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名：红髦：导师签名：彳正一一徐州医学院硕士学位论文论文审阅认定书研究生反蕴在规定的学习年限内，按照研究生培养方案的要求，完成了研究生课程的学习，成绩合格；在我的指导下完成本学位论文，经审阅，论文中的观点、数据、表述和结构为我所认同，论文撰写格式符合学校的相关规定，同意将本论文作为学位申请论文送专家评审。聊虢应日期：垫Qz生幽f徐州医学院硕士学位论文ERK／P38M

6、APK信号转导通路在人脐动脉血管平滑肌细胞表型转化中的作用中文摘要第一部分人脐动脉血管平滑肌细胞培养与鉴定目的建立人脐动脉血管平滑肌细胞(H^SMC)体外培养模型。方法运用改良的植块贴壁法体外培养VSMCs，在倒置显微镜下进行细胞形态学观察并对培养的细胞进行SMa—actin免疫组化鉴定。结果培养的细胞生长良好，光镜下呈长梭形及“峰与谷”样生长。SMQ—actin免疫组化的结果显示培养的细胞具有典型的HAS～IC特征。结论改良植块贴壁法能使HASMC原代培养的时间明显缩短，传代后HASMC生物学特征的稳定性好，成功建立了H

7、ASMC体外培养模型。关键词肌，平滑，血管，细胞培养第二部分ERK／P38妣PK信号转导通路在人脐动脉血管平滑肌细胞表型转化中的作用目的探讨PDGF-BB及米诺环素通过ERK／P38MAPl(信号通路的调节，对人脐动脉血管平滑肌细胞表型转化的影响及其分子机制。方法①建立HASMC体外培养模型，分为米诺环素0，7．5，15，30，60，120，150／Mmol／L组，采用M'rr法检测米诺环素对细胞的毒性；②建立HASMC体外培养模型，分为无血清的DMEM，PDGF-BB(20ng／mL)，PDGFoBB(20ng／mL)+

8、PD98059(3陬mol／L)+SB203580(2qumol／L)，PDGF-BB(20ng／mL)+米诺环素(1和mol／L)，2徐州医学院硕士学位论文PDGF-BB(20ng／mL)+米诺环素(30／Mmol／L)五组，采用半定量RT-PCR检测h-caldcsmon,calponinmRNA表