静电纺明胶p3hb4hb可吸收膜生物相容性的研究

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1、《中国图书资料分类法》分类号:单位代码:10660R783学号:S100348贵阳医学院2013届硕士学位论文静电纺明胶/P3HB4HB可吸收膜生物相容性的研究研究生:曾筱导师:王永教授张磊教授年级:2010级专业:口腔临床医学2013年5月21日目录摘要…………………………………………………………1页前言…………………………………………………………2页材料与方法……………………………………………………4页结果…………………………………………………………10页讨论…………………………………………………

2、………20页结论…………………………………………………………24页参考文献………………………………………………………25页英文摘要………………………………………………………27页致谢…………………………………………………………28页学位论文独创性声明…………………………………………29页附:综述……………………………………………………30页贵阳医学院2013届硕士研究生学位论文静电纺明胶/P3HB4HB可吸收膜生物相容性的研究专业:口腔修复学研究生:曾筱导师:王永教授张磊教授中文摘要摘要:目的:本实验

3、通过静电纺丝技术成功获得不同含量聚-3羟基丁酸脂-4羟基丁酸酯(P3HB4HB)的明胶/P3HB4HB可吸收膜材料,即1:1明胶:P3HB4HB及1:3明胶:P3HB4HB可吸收膜,评价此材料的细胞毒性,以及生物相容性,对其作为引导骨组织再生膜可能的临床应用提供重要数据。方法:培养鼠原代成骨细胞,行细胞鉴定;溶血试验来检测P3HB4HB、1:1明胶/P3HB4HB、1:3明胶/P3HB4HB三种膜材料的细胞毒性;测试不同比例明胶/P3HB4HB材料对成骨细胞增殖及活性的影响,分别用扫描电镜(SEM)观

4、察细胞在膜材料上的生长情况,用MTT法测试细胞增殖率,并测定成骨细胞中ALP比活性观察材料对细胞活性的影响。结果:培养的细胞表现成骨细胞的生物学特性,符合进一步实验要求;溶血反应中P3HB4HB、1:1明胶/P3HB4HB、1:3明胶/P3HB4HB的溶血率分别为4.7%、2%、2.3%,均小于5%,无溶血现象,符合生物学要求。成骨细胞附着于材料后经扫描电镜观察,成骨细胞附着于三种材料上生长良好,并随着时间延长而展开生长于膜材料表面。随着时间点的增加,1:3明胶/P3HB4HB组细胞增殖率始终都比1:

5、1明胶/P3HB4HB和P3HB4HB组的高,有明显差异(P<0.05)。在ALP比活性检测中,1:3明胶/P3HB4HB较其余组有明显差异(P<0.05)。结论:明胶/P3HB4HB膜材料无细胞毒性,经扫描电镜可见成骨细胞在膜材料上粘附时形态正常;同时加入明胶的P3HB4HB组较P3HB4HB组有较高的细胞增值率、ALP比活性,以比例为1:3明胶/P3HB4HB的效果为显著,说明明胶/P3HB4HB膜材料有利于成骨细胞的增殖与附着,生物相容性良好,而1:3明胶/P3HB4HB膜材料更有潜力应用于GB

6、R技术中。关键词:明胶/P3HB4HB;生物相容性;可吸收膜*基金项目:1、贵州省科学技术基金,黔科合J字(2010)2177号。2、贵州省优秀科学技术省长基金。3、贵州省科学技术联合基金,黔科合J字(2012)002号。1贵阳医学院2013届硕士研究生学位论文前言目前,由牙周病、根尖病变、创伤等导致不同类型的牙周组织缺损,在拔牙后所造成的局部剩余牙槽骨吸收,以及在种植义齿修复时骨量不足等所引起牙齿支撑组织不足是种植修复的难题之一。这一难题主要通过能够在缺损部位增加骨量或改善骨质量的引导骨组织再生术(

7、GuidedBoneRegeneration,GBR)来进行[1]治疗。这一技术中,GBR支架材料/膜是关键因素之一,其要求膜材料的孔隙结构合理,并且不能对成骨细胞的生长、增殖和分化有抑制作用;需要能有效的阻挡牙龈软组织上皮和结缔组织比成骨细胞等快速的进入骨缺损部位,要求保留骨缺损部位有一相对稳定骨组织生长及代谢的再生空间。骨缺损处的新骨形成主要是由位于骨膜发生层的成骨细胞来承担,此时膜材料成为了骨端骨膜再生的支架,引导具有成骨性的细胞粘附并向缺损区域迁移,通过这样的过程实现引导骨再生和控制再生组织结

8、构的目的。而用于GBR的材料随着高分子材料学的发展已从生物相容性稳定、不可吸收膜材料向具有可吸收性、暂时性膜材料过渡,其优势是避免例如不可吸收的钛膜和聚四氟乙烯膜需要二次手术取出所引起的第二次手术时间和花费,以及可能发生的并发症,近年来成为口腔种植手术中少量颌骨缺损修复材料研究的热点之一。目前临床上大多使用的可吸收膜以胶原膜为[2]主,周磊等研究表明胶原膜应用后出现伤口裂开、膜暴露的风险明显较不可吸收的钛膜少,但胶原膜塑形性差,稳定性差、降解速度快,在新

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