胰岛分离纯化培养后活性及异种移植研究

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1、温州医学院硕士学位论文答辩委员会主席：鉴二坠堂垦答辩委员会成员：至!丝塑萼潮散爱髅熬眨论文答辩日期：一-0一三耻硐二砌温州I医学院硕士学位论文目录缩略词简表⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6英刘商要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8前’言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第一部分大鼠胰岛分离纯化及培养条件的优化选择⋯⋯⋯⋯⋯．．131．1仪器和材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．131．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一131．2．1最佳胰岛分离纯化介质的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l31．2．1．1实验动物和分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．131．2．1．2大鼠胰岛的分离纯化程序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．131．2．1．3胰岛计数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2．1．4胰岛存活率检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．141．2．1．5体外静止葡萄糖刺激胰岛素释放实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2．2最佳胰岛培养介质的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．151．2．2．1分离纯化后胰岛的培齐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．3统计学分析⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．151．4实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．161．4．1最佳胰岛分离纯化纯化介质的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．4．1．1光镜下胰岛形态⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．4．1．2收获胰岛数量⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．4．1．3分离纯化后胰岛存活率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17温州医学院硕士学位论文1．4．1．4体外静止葡萄糖刺激胰岛素分泌能力．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．17I．4．2最佳胰岛培养介质的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯181．4．2．1培养后胰岛存活率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯．．181．4．2．2体外静止葡萄糖刺激胰岛素分泌能力．⋯⋯⋯⋯⋯⋯一19讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20第二部分家兔颈动脉人造血管移植装置移植及疗效评价⋯⋯⋯⋯212．1家兔颈动脉人造血管移植装置的描述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2i2．2仪器和材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222．3实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222．3．1家兔糖尿病模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222．3．2包裹胰岛的微囊的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222．3．3手术前准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯一232．3．4人造血管装置植入手术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．3．5人造血管装置植入手术后护理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．3．6人造血管移植装置手术后家兔血糖的测定⋯⋯⋯⋯．．．⋯．．262．3．7终止实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．262．3．8实验终止后扫描电镜观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．4统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．5实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．5．I实验动物数量分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．262．5．2移植后血流通畅时间⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．5．3移植后家兔血糖变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27温州医学院硕士学位论文2．5．4人造血管移植装置扫描电镜观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．29第三部分微胶珠化胰岛肌肉内移植治疗小鼠I型糖尿病⋯⋯⋯⋯303．1仪器和材料⋯⋯⋯⋯⋯：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3O3．2实验方法⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．303．2．1实验动物的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．303．2．2C57BL／6小鼠糖尿病模型的建立⋯．．j⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3

7、03．2．3SD大鼠胰岛分离纯化及培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯303．2．4胰岛计数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．313．2．5扫描电镜观察纯化后大鼠胰岛外形及被膜情况⋯⋯⋯⋯．313．2．6胰岛微胶珠化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．313．2．7移植前胰岛、微胶珠化胰岛存活率检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．313．2．8大鼠胰岛微胶珠植入小鼠肌肉⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯313．2．9口服糖耐量实验(OGTT)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯323．2．10移植后疗效评价及移植物观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．323．3统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯323．4实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯