细胞外信号调节激酶在氨基酮戊酸—光动力疗法杀伤皮肤鳞状细胞癌中的作用及机制的研究

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1、分类号：R75单位代码：10752密级：公开学号：2010102宁夏医科大学硕士研究生学位论文细胞外信号调节激酶在氨基酮戊酸-光动力疗法杀伤皮肤鳞状细胞癌中的作用及机制的研究Roleandmechanismofextracellularsignalregulatedkinase(ERK1/2)inALA-PDTkillingskinsquamouscellcarcinoma学位申请人：张秀娟指导教师：葛新红副教授申请学位门类级别：医学专业名称：皮肤病与性病学研究方向：皮肤鳞状细胞癌的光动力学治疗所在学院：临床医学院论文完成日期

2、：二○一三年四月宁夏医科大学研究生部NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeRoleandmechanismofextracellularsignalregulatedkinase(ERK1/2)inALA-PDTkillingskinsquamouscellcarcinomaStudent’sName:ZhangXiuJuanSupervisor：GeXinHongSubjectCategory:MedicalScienceMajor:Derma

3、tologyandVenereologySpecialty:PhotodynamictherapyofSCCSchool:NingxiaMedicalUniversityCompletionDate:Apr.2013宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的

4、法律结果由本人承担。论文作者签名张秀娟论文导师签名葛新红2013年5月20日2013年5月20日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名张秀娟论文导师签名葛新红2013年5月20日2013年5月20日宁夏

5、医科大学硕士学位论文中文摘要细胞外信号调节激酶在氨基酮戊酸-光动力疗法杀伤皮肤鳞状细胞癌中的作用及机制的研究摘要目的探讨细胞外信号调节激酶（Extracellular-signalRegulatedProteinKinaseERK）在δ-氨基酮戊酸光动力疗法（5-AminolevulinicAcidforPhotodynamicTherapyALA-PDT）杀伤皮肤鳞状细胞癌(SquamousCellCarcinomaSCL-1)细胞中的作用及机制，为ALA-PDT治疗皮肤鳞状细胞癌提供新的实验室依据。方法将SCL-1细胞分为

6、空白对照组（con组），红光照射组，ALA组，ALA-PDT组，ERK阻断剂组。用western-blot检测各组细胞干预30min，60min，90min后ERK1/2蛋白产物及磷酸化ERK1/2蛋白产物的表达；用细胞免疫荧光化学法检测各组细胞干预30min，60min，90min后磷酸化ERK1/2蛋白产物的表达；用MTT酶联免疫法检测各组细胞干预24h，48h，72h后的光密度值，计算细胞的存活率；用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测各组细胞干预后24h，48h，72h细胞的凋亡率；用电子显微镜技术观察各

7、组细胞干预后24h，48h，72h细胞超微结构的变化。结果经western-blot检测，ERK1/2蛋白产物在各组细胞中表达差别无统计学意义，磷酸化ERK1/2在空白对照组、红光照射组、ALA组细胞中的表达无明显差别，在ALA-PDT组细胞中的表达明显高于其余各组，在ERK阻断剂组细胞中的表达明显低于其余各组；细胞免疫荧光化学检测的结果和western-blot一致；MTT检测结果表明，空白对照组、ALA组及红光照射组之间相比细胞存活率无明显差别，ALA-PDT组细胞的存活率与空白对照组、ALA组、红光照射组之间相比明显降低

8、，ERK阻断剂组细胞的存活率与空白对照组、ALA组、红光照射组、ALA-PDT组之间相比更加降低；流式细胞仪检测结果表明，空白对照组、ALA组及红光照射组之间相比细胞凋亡率无明显差别，ALA-PDTI宁夏医科大学硕士学位论文中文摘要组细胞的凋亡率与空白对照组、ALA组、红光照