第一部分单核细胞亚群在原发免疫性血小板减少症中的分布及功能研究;第二部分il-35在原发免疫性血小板减少症中的表达及其临床意义

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1、中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文博士学位论文(专业学位)学校代码：10023学号：B20l0014024第一部分单核细胞亚群在原发免疫性血小板减少症中的分布及功能研究。第二部分IL-35在原发免疫性血小板减少症中的表达及其临床意义所院：血液学研究所血液病医院姓名：杨艳辉指导教师：杨仁池导师小组：中法实验组学科专业：内科学(临床型)研究方向：止血与血栓疾病的基础与临床完成日期：2013年4月中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文目录第一部分单核细胞亚群在原发免疫性血小板减少症中的分布及功能研究‘中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言”·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯一⋯”⋯⋯⋯⋯“⋯一“”⋯⋯⋯一⋯”7刖吞”一⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯”⋯一⋯”⋯⋯⋯⋯“⋯‘“‘”⋯⋯⋯一⋯”，材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10结果⋯⋯⋯⋯⋯”⋯·⋯⋯”·⋯⋯⋯”⋯·⋯⋯⋯⋯．．⋯·⋯“⋯·⋯一⋯·16讨论···⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯···⋯⋯．．．?⋯⋯⋯⋯⋯···⋯”25结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·····⋯·⋯⋯⋯⋯⋯“⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28第二部分IL-35在原发免疫性血小板减少症中的表达及其临床意义中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33前言·一⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”3b一日0吾”一⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”J材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”·⋯⋯⋯⋯⋯一⋯·44讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯·一⋯⋯⋯⋯⋯⋯·

4、一·48结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”·一·50参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51综述单核细胞亚群的功能及其在自身免疫性疾病中的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯63附录一主要实验仪器与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯67附录二主要溶液配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯70附录三缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72附录四在学期间发表文章⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯74致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯”·”⋯⋯⋯⋯⋯·76学位论文原创性声明和授权使用说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯772中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文第一部分单核细胞亚群在原发免疫性血小板减少症中的分布及功能研究木摘要木研究背景：单核细胞是一群极具异质性的细胞，在固有免疫、炎症和自身免疫反应中发挥着重要的作用。1989年，在二色法流式细胞术基础上，一种新的CDl6+单核细胞被首次报道。这一群CDl6+单核细胞比常规的单核细胞(经典型)有更强的分泌促炎因子能力和抗原递呈能力，因而被认为是一类“促炎单核细胞

6、”，在细菌或病毒感染、炎症性疾病和多种自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、克隆氏病中均出现明显扩增。近年来，越来越多的证据支持将这群CDl6+单核细胞依据不同的表型和功能进一步细分为：中间型(CDl4++CDl6+)和非经典型(CDl4+CDl6++)单核细胞两个亚群。原发免疫性血小板减少症(primaryirllmuncthrombocytopcnia，lTP)作为一种自身免疫性疾病，存在多种复杂的免疫缺陷，单核细胞亚群在ITP中的分布情况及在发病机制中的作用尚待深入阐明。目的：研究在ITP病人中，单核细胞亚群的分布情况，并探讨其在ITP发病中的

7、作用机制。方法：采集外周血，流式细胞术检测71例未治疗活动期ITP患者、23例正在应用糖皮质激素治疗患者和49例健康对照外周血单核细胞亚群的分布情况，分析单核细胞亚群的分布与血小板数之间的关系，ELISA法检测血浆中主要由单核细胞分泌的细胞因子水平。用流式细胞分选技术分选出经典型、中间型、非经典型三个单核细胞亚群，ELISA法分别检测体外不同亚群在LPS刺激下的分泌细胞因子的能力。将分选出的不同单核细胞亚群分别与CD4+T细胞和自体血小板共培养，BrduELISA检测各亚群对血小板特异性自身反应性T细胞增殖的作用，并通过ELISA检测共培养上清

8、IFN=y水平了解其对于111l细胞分化的影响。结果：结果显示，未治疗的活动期ITP患者非经典型单核细胞出现显著扩增(ITP：5．44％【0．36％一