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《镰孢属几种植物病原真菌分子核型的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、菌物系统一,几如镰抱属几种植物病原真菌分子核型的研究尚晓冬郑小波陆家云南京农业大学植保系农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京摘要利用脉冲电场凝胶,,电泳研究了株串珠镰抱仔公肠、株尖镰抱刁、株茄镰抱和株矛初。的分子核型以及不同地域和寄主来源的串珠镰抱种内菌株间的分子核型差异以凝胶包埋法不破除分生抱子细胞壁制备供试菌株电泳样本,采用组条件组合进行电泳,分离出供试串珠镰抱完整染色体条,分子量分布范,围基因组大小为尖镰抱条,分子量分布范围一,基因组大小为茄镰抱条,分子量分布范围,基因组大小为印,,。,供试种镰抱菌染
2、色条分子量分布范围基因组大小为结果表明、分子量及基因组大小都有较大不同,。不同来源的申珠镰抱体数目分子核型差异较大种内菌株间分子核型亦有明显差异。关扭词镰抱属脉冲电泳分子核型中一圈分类号文献标识码文章编号刃脉冲电场凝胶电泳企,、王是八十年代中期发展起来的一种分离,,。分析生物体大分子叫叭的技术可用于分离真菌完整染色体分子肠利用,可获得显示真菌完整染色体数目与各完整染色体技术叫分子大小的谱带即分子核型植物病,。,原真菌的分子核型分析在真菌分类中的应用在国外已有一些报道蒋继志等已证明同种真菌,不同菌株间分子量较大
3、的染色体分子具稳定的相似性较小染色体的分子大小和数量可以,可用于阐明不同种及种下类群变种、小种、致病型、有差异营养体亲和群分子核型上的相似性和多样、,性将该技术与尹八卫等其它分子生物学技术相结合使用还可应用于基因组结构分析及生物多,,,,、样性研究儿曾荣等在国内刘维达等等,。曾研究过一些酵母的分子核型但尚未见植物病原真菌分子核型的研究报道作者利用对镰抱属几种重要植物病原真菌的分子核型进行了研究,现将结果报道如下材料与方法供试菌株本研究所用供试菌株编号、寄主及采集地见表。上述菌株均为本实验室保存菌种几种链抱菌完
4、整染色体制备。主要参照蒋继志等的凝胶包埋法并做适当修改供试菌株在斜面上℃培养一天后,接种于盛有马铃薯葡萄糖培养液方中达,而平底烧瓶中,每瓶接种菌丝块大小,。,,块℃振荡培养天转分钟以目尼龙筛过滤培养液去除菌丝体滤液基金项目国家自然科学基金与高校博士点基金资助项目收稿一,一日期刃修稿日期佗菌物系统卷表供试菌株种名、编号、寄主、采集地,,用种名编号寄主采集地,一、︼卫山门廿,﹃﹄、‘了心。,厂阴扣舰咧大豆南京串珠镰抱台句棉花南京水稻无锡又玉米南京掬句双。习尖镶抱口卜斗利茄镰抱一未知,,,,,离心转分钟℃分钟去上清
5、用叮洗涤沉淀将抱子悬浮液,。用而溶液,移人离心管中离心条件同上,一,,,。琉基乙醇悬浮抱子沉淀水浴℃分钟离心条件同上用溶液】几,几悬浮抱子沉淀,浓度调整至个抱子毫升血球记数板法吸取耐抱子悬浮液,加人预先溶解在中的低熔点琼脂糖,完全混匀后注人预冷的模具,,。中℃冷凝分钟制成样本块样本块用溶液叮,,,,。,璐浸泡分钟加人而蛋白酶硫代℃水浴处理小时倾去管内液体以,,,,浸泡样本块℃小时中间更换汀一次倾去管内液体以洗涤样本块次分钟次。最后用保存样本块℃备用电泳电泳仪为。卜巨,电泳槽,严电泳缓冲液为温度℃,、,电流强度
6、东西及南北电场脉冲时间相同电泳条件参考等蒋继志等。本研究采用组电泳条件,、琼脂糖做适当修改分别用于分离不同分子量的完整染色体分子,孙,电泳小时,电压伏脉冲时间秒,电即浓度分两阶段进行脉冲时间秒乙,电压伏,用、,泳小时以分离分子量小于的染色体分子琼脂糖浓度分三阶段进行脉冲时间秒,电泳小时,电压伏脉冲时间秒,电泳小时,电压伏脉冲时间,,,、,秒电泳小时电压伏用以分离分子量为的染色体分子琼脂糖浓度,,,叫。脉冲时间秒电泳小时电压伏用以分离分子量大于的染色体分子分别以条、、,,,件电泳电泳结束后用“染色分钟电泳缓冲液
7、褪色分钟暗室中用紫外检测仪观察拍照。对样本在上述组不同条件下的电泳结果进行综合分析,获得供试菌株的分子核型。结果供试镶抱属菌株染色体数目与各染色体完整分子估算期尚晓冬等镰抱属几种植物病原真菌分子核型的研究,,。量分布为一基因组大小为一与已报道的结果较接近尖镰抱的分子核型,不同研究者有不同的结果,等从该种菌株中分离出一条染色体,其基因组大小为,,,一而肠等则分离出条染色体叫分子量分布为基。,,,因组大小为一本研究中分离出条尖镰抱染色体分子量分布为,。,基因组大小为处于已报道结果的变化范围内对于茄镰抱故等分离出条
8、染色体,分子量分布为,基因组大小为。本研究获得的茄镰抱染色体,一,,与,数目为条分子量分布为基因组大小为已报道的结果有较大不同是否由于供试菌株不同所致,尚待进一步研究。,、,过去对凡‘细。习印」甸分子核型研究表明,同种真菌叫,,不同菌株共有几条较大的染色体分子量相同显示出种的相似性其它分子量较小的染色体分,子可有大小和数目上的差异同时这些分子量较小的染色体分子、生理小种等内呈现出较高的相似性,又在真
