茶多酚对poag来源的小梁细胞抗氧化损伤的实验研究

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3、目的：本实验的目的在于初步阐明茶多酚对原发性开角型青光眼来源的小梁细胞有抗氧化损伤的作用。并为茶多酚在眼科其他领域的运用提供实验依据。方法：1、材料：复苏后传3．5代GTC置于DMEM应用液，于5％C02的370C条件下培养。2、实验分组：将处于对数生长期的GTC随机分为4组，对照组，实验组1、2、3，其中实验组1、2、3分别添加浓度为5、10、20mg／L的TP，对照组加入等量的DMEM应用液，加入TP培养24小时后，采用蛋白免疫印迹法即蛋白质印迹杂交(Westernblot法)测定各组小梁细胞胞色素C(CytochromeC，Cyt

4、C)的释放，采用荧光定量多聚酶链反应(FluorescencequantitativePCR)测定各组小梁细胞复合物I信使核糖核酸(ComplexIMessengerRNA，ComplexImRNA)的表达水平，采用流式细胞术测定各组小梁细胞的细胞凋亡率。结果：l、TP对小梁细胞生长的影响与POAG组相比，各茶多酚组细胞凋亡率均降低，差异均有统计学意义(P<0．05)；不同浓度的茶多酚组间随着茶多酚浓度的增加，细胞凋亡率随之下降，各浓度组间的差异具有统计学意义(P<0．05)2、Westernblot法测定各组小粱细胞CytC的释放与P

5、OAG组相比，各茶多酚组cytc的释放均降低，差异均有统计学意义(P<0．05)；不同浓度茶多酚组间随茶多酚浓度增加cytC的释放下降，各浓度组间的差异具有统计学意义(P<0．05)3、荧光定量PCR测定各组小梁细胞ComplexImRNA的表达水平与对照组相比，各茶多酚组complexImRNA表达均增加，差异均有统计学意义(P<0，05)；不同浓度茶多酚组间随茶多酚浓度增加complexImRNA表达增加，各浓度组问的差异具有统计学意义(P<0．05)：结论：摘要1、外源性茶多酚对POAG患者小梁细胞的氧化损伤有保护作用；2、在一定

6、的浓度范围内，茶多酚浓度增加，其抗氧化作用也逐渐增强。关键词：茶多酚；原发性开角型青光眼；氧化应激；llIAbstractABSTRACTObjective：Thepurposeofthisstudyistoclarifytheteapolyphenolshastheantopxidationeffecttotrabecularceilsinprimaryopenangleglaucoma．AndprovidestheexperimentalbasisfortheapplicationofteapolyphenolsintheDepar

7、tmentofophthalmologyMethods：1、material：recoveryHTC，GTCandgodowntothefuturegenerationto3-5．putintotheDMEMapplicationsolution，culturedin5％C02370Cconditions．2、Experimentalgroups：dividethecellsinthelogarithmicgrowthphaseintofourgroupsrandomly：Controlgroup，theexperimentalgrou

8、pl，2，3，addtheconcentrationof5，10，20mg／LTPintotheexperimentalgroupof1，2，3respectivelywhileaddingflaesame