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1、第卷2第期63..植物保护学报21年月9999.CAAP()PICICAAIISCAYHSYHP1NDA分子标记在植N物真菌病害研究中的应用陈万权冯洁秦庆明,1(中国农业科学院植物保护研究所北京0。。94)康晓慧,(四川绵阳经济技术高等专科学校绵阳)摘要综述了近年来DNA分子标记技术在植物真菌病害研究中的应用现状和,、、、、潜力内容涉及病原菌的种类鉴定群体遗传毒性变异毒性基因迁移菌源传播及植物杭病基因定位、克隆和标记辅助选择等植物病理学的诸多方面,列举了,,代表性应用实例展望了DNA分子标记技术在植物病理学研究中的广阔前景提出了我国今后进一步开展有关研完的基本途径。,,,,关键词植物真菌
2、病害分子标记群体遗传毒性基因迁移抗病基因定位,s`刁,80年代初Bioetin等【3首次成功地使用RIFP作为遗传标记构建人类遗传连锁图,,随后基于DNA多态性的各种分子标记技术发展迅速并在动植物遗传学研究中得到广。,J、泛应用限制性片断长度多态性(restrietionfragmentlengthpolymorphismRFIp)微卫,、星DNA(mierosatelliteDNA)又称简单重复序lpJ(simplesequeneerepeatSSR)随机扩,、增多态性DNA(randomamplifiedpolymorphicDNARAPD)DNA扩增指纹(DNAaeatonnger
3、prntn,、seueneeearaeterzeaemplifiifiiigDAF)定睦扩增区段序列(qhidmplifid,、,regionsseAR)串联重复序列单位数量变异(variablenumberoftandemrepeataeraentenoors,一vNTR)及扩增片断长度多态性(mplifidfgmlgthplymphimAFIp)等技,,术的先后问世为植物和病原真菌相互作用的遗传研究提供了丰富的遗传标记增强了遗,。传分析能力近年来已越来越多地应用在植物真菌病害的各个方面1DNA分子标记在植物病原真菌研究中的应用1·1病原菌的系统分类DNA的多态性为植物病原真菌的种类鉴
4、定提供了大量的遗传标记。RFLP技术、。so-RAPD技术及DNA指纹分析业已成功地应用在多种植物病原镰刀菌(F.usar心m却p.....、、、ru川fspp)禾谷类白粉菌(E卿siPhegraminisfspeerealis)锈菌(pueciniaspp)马、、铃薯晚疫菌(p勺toPhthorai双festans)小麦叶枯菌(SePtoiratirtioi)腐霉菌(p勺thium.、、、。,SP)等植物病原真菌的种亚种专化型生理小种或致病类型的鉴定和诊断中例如植物保护学报卷2t仁多,4`,``iniaszrirn,15mS等h2利用个随机引物对i大麦(1条9锈9)菌(p确)和大麦叶锈
5、菌.o,,。h,dei)PDano￡3〕(P进行RA分析有效地区分了这两种锈菌Zmbi等(1992)通过DNA...。oa、a二。尸、ga序列分析研究了燕麦冠锈菌(pcl`in印(r,atfpen)小麦秆锈菌(parmiln.....、、n。sfptlrt’l)小麦叶锈菌(perodltfplirlt,l)等10多种禾谷类锈菌种和专化型的,DNA(r系统发育关系表明核糖体DNA)ITS序列分析对于研究禾谷类锈菌近缘种及种内专化型的系统发育和分类行之有效。1.2病原菌的群体遗传由于经典遗传标记诸如形态特征、有性亲和性和无性亲和性、毒性、抗药性及营养缺,。陷型突变体等均为表型特征对植物病原真
6、菌的群体遗传研究有其致命弱点而同工酶标,,。记数量有限活性表现有时空特异性在检测种内遗传分化方面亦受到很大限制90年代,,初以PCR技术为基础衍生的DNA分子标记的开发利用对病原物群体遗传研究产生,,。了深远的影响在研究种内遗传分化上RAPD方法显示了其独特的优越性GOodwin等亡’习PD五ero、。。riaoanc:,lan、(1991)用RA方法首次成功地将油菜黑胫病菌(PP八)的毒性和。let沉irhc“m,、非毒性分离系区分开来在对禾谷刺盘抱菌(6garilJln闭al)茄病镰刀菌..`om、。。、。u、、、(凡、lr耐i)尖袍镰刀菌(F划stPt,rm)禾谷镰刀菌(Fgarm
7、iaeom)禾谷类白..、、:coastrr、s、、粉菌小麦叶枯菌小麦条锈菌(P“iii币mifpzriti百)小麦叶锈菌小麦秆锈、、rcuar以。za。、euaae菌马铃薯晚疫菌稻瘟菌(yPizi划)棉花黄萎菌(Vrti百llimdhli)等10,、多种植物病原真菌的群体遗传研究中均发挥了重要作用分别揭示了病菌的群体结构群体多样性、群体变异、群体内遗传分化及基因图谱等方面的特征。例如,sazbo等(1996少〕,,通过构建小麦秆锈
