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时间:2019-03-06
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1、摘要甲....................-....................口口口曰口.口.口..口.........口.目..口目...........口卜..口口................摘要本研究主要是通过对不同花色一串红的花发育过程、组织培养快繁方法和Ss5.NaT1基因进行了研究,首次观察一串红的花芽分化和胚胎学有关内容,探讨了影响一串红结实性的原因、最佳组织培养快繁体系,揭示了花色基因Ss5NaT1的多态性,花发育研究结果表明,一串红的花芽分化是从第4个叶节开始,在第9个叶节时分化结束,花药壁的发育方式为双子叶型
2、,成熟花粉粒为三细胞型,胚囊的发育方式为要型,表明一串红结实率低的原因不是由于雄、雌配子体的发育不良所造成。八种花色的一串红的结实率、落花率及成熟胚珠败育率调查结果表明一串红的平均结实率为15.81%,平均落花率为23.13%,成熟胚珠败育率为84.13%0一串红组织培养的最佳外植体为带腋芽的茎段,茎段的芽丛诱导的最佳培养基为1/2MS+NAAO.lmg/L+6-BA2.Omg/L+IBA0.5mg/L,其分化率为71.4%,芽增殖率为140.6%;最佳生根培养基为1/4MS+NAA0.5mg/L,生根率为91.6%,初步建立了快繁体系。通过
3、RT-PCR方法获得了八种一串红中Ss5.d/aT1基因的916bp的cDNA片段,根据获得的cDNA片段设计了4对引物,采用嵌套式PCR的方法,以RT-PCR的产物为模板进行扩增,对扩增产物进行SSCP分析,发现只有一对引物的扩增产物出现了差异带,而其它三对引物无差异带.基因测序的结果表明:RT-PCR扩增获得的cDNA片段,同源性相当高,只在鲤鱼肉色花和玫瑰红色花两种花色中发现了一个点突变,即玫瑰红色花在744C-10,T,蛙鱼肉色花中的678C-1T,玫瑰红色花中的点突变导致异亮氨酸(Ile)突变为苏氨酸(Thr),而蛙鱼肉色花中的点突
4、变导致了缘氨酸(Val)突变成丙氨酸(Ala),而其它花色没有发现突变点。基因克隆测序的结果与PCR-SSCP分析的结果一致,表明PCR-SSCP可以用于花色墓因的突变点的检测。关键词:一串红:结实性:组织培养:花色基因;PCR-SSCP东北农业大学理学硕士学位论文THEFLOWERDEVELOPING,FASTPROPAGATIONSSYSTEMESTABLISHEDANDSTUDYOFFLOWRCOLORGENEPOLYMORPHISMINSALIVASPLENDENSAbstractInthisstudy,ideterminedthec
5、auseofaffectingfecund勺ofsalviasplendens,thebestsystemoftissueculturefastpropagationssystemandclarifiedflowercolorgeneSsSMaTlpolymorphism,throughstudyingontheembryologicalstructureinflowerdelevoping,thewayoftissueculturefastpropagationsandflowercolorgene妙PCR-SSCPcombiningwit
6、hsequencing,aTheresultofflowerdelevopingshowedthattheflowerbudmorphologicaldiferentiationbeganat4thleafburlandfinishedat9thleafburl,andthewallofantherwasdicotylstypeMoreover,maturemicrosporewasthree-cell勺rpe,and脉delevopingpaywayofmegasporewaspolygonurntype,whichtestifiedtha
7、ttheseedingratelowwasn'tduetotransmissibilitymalegametophyteandfemalegametophytefailinggrowth.TheresultsofobservatingthenumberofseedingsisdiferentcolorbreedindicatedtheavergeseedingrteinSalivasplendenswas15.8114,andtheavergedropflowerratewas23.130l0.thematureovulefailinggro
8、wthratewas84.1o%Thebestexplantintheculturewasstemsegmentwithbud,andthebestmediumof
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