化学发光试剂在有机分子检测中的应用

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1、266化学试剂2004年化学试剂,2004,26(5),266~270;274专论与综述化学发光试剂在有机分子检测中的应用*魏新庭,刘道杰(聊城大学化学化工学院,山东聊城252059)摘要:介绍了化学发光试剂的发展历程及主要类型,综述自1997年以来化学发光试剂在有机分子检测中的应用。关键词:化学发光试剂;有机分子;检测;综述中图分类号:O6441文献标识码:A文章编号:0258-3283(2004)05-0266-05化学发光试剂可用于检测金属离子、无机及我国化学发光分析的研究起步于20世纪60有机分子。目前测定的金属离子和无机分子较年代,90年代达到高峰,主要工作是

2、检测无机物多,利用化学发光分析法已检测的金属离子、无机和无机离子。近年来的研究侧重于有机分子的检[2]分子超过30多种。由于化学发光分析具有信噪测。章竹君等在鲁米诺的合成及发光仪的研制比大、线性范围宽,高灵敏度的特点,化学发光试方面有较大的进展。庄惠生等合成异硫氰酸鲁米[3]剂广泛用于生物、医药、食品、环境等样品的检测诺用于化学发光测定酵母RNA。吕太平等合与分析。本文综述了自1997年以来化学发光试成了一种亲酯性荧光试剂用于制作光纤氧传感剂在有机分子检测中的应用。器,不仅可测定气体或溶液中的氧分压或氧浓度,还能以它为基础传感器,制作酶传感器或酶免疫1化学发光与化学发光试剂的发展传感器,通

3、过测定一些生化反应中消耗或产生的化学发光(CL)是指某物质(可以是反应体系O2,从而间接地对酶或底物、抗原或抗体进行定量中的反应物、产物、中间体或荧光物质)吸收化学[4]测定。徐溢采用葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄反应体系放出的能量,由激发态回到基态发生光糖与氧分子反应,生成葡萄糖酸和过氧化氢,采用辐射的现象。过氧化酶(POD)催化鲁米诺的化学发光反应对过人类很早就观察到了自然界中的发光现象,[5]氧化氢进行检测,用于糖尿病检测。李善茂等萤火虫的荧光、磷光、某些鱼类的发光等。有文献合成了3种发光试剂,荧光强度均大于鲁米诺。记载的化学发光反应体系始于1877年,目前,有关鲁米诺发光体系的研究较

4、多,利用有效Radziszewski首次发现洛吩碱(Lophine,2,4,5-三苯的分离手段、并与生物化学的方法相结合是提高基咪唑)在碱性介质中与氧反应发出金黄色的光。化学发光分析法的选择性与灵敏度的有效手段。1928年Albrecht等报道了鲁米诺(Luminol,3-氨基苯二甲酰肼)在碱性介质中的化学发光行为。2化学发光试剂(CLR)的类型1935年Gleu等第1个报道了光泽精(Lucigenin,21鲁米诺(1)、异鲁米诺(2)N,N-二甲基二吖啶硝酸盐)与过氧化氢反应产生绿光的化学反应。McCapra等于1964年提出吖啶酯类物质的发光机理。1966年Lytle等发现金2+属

5、离子配合物钌()-联吡啶[Ru(bpy)3]的溶液鲁米诺是研究最多、应用最广泛的化学发光中加芳胺时能够发出橘红色的光,且这种配合物试剂之一。在碱性介质中它能被许多氧化剂(过的水溶性好,稳定性好,发光效率高,是一种优良的化学发光试剂(CLR)。Rabaut于1967年,Kopecky于1969年分别合成了二烷酮和过氧草收稿日期:2003-08-04酸盐的衍生物相继合成。国外发现了许多化学发作者简介:魏新庭(1966-),男,山东阳谷人,硕士生,主要研[1]光试剂及化学发光体系。究方向为生物发光分析。第26卷第5期魏新庭等:化学发光试剂在有机分子检测中的应用267氧化氢、氧气、次氯酸盐、碘

6、、高碘酸钾、过硫酸钾24二氧杂环丁烷类等)氧化,发出蓝色的光,量子产率最大为5%1,2-二氧杂环丁烷类于1969年发现,稳定性(001~005),鲁米诺本身被氧化成3-氨基酞差,后来有人合成了一些稳定的类似物,常用的有(羧)酸盐(3-APA)。在水溶液中的最大吸收波长3-甲氧基-4-螺(1,2-二氧杂环丁烷-3,2-三环[3,为425nm。用过氧化物作氧化剂时,常用的有机3,1,1,3,7])-癸烷)-4-磷酸二钠盐(AMPPD)。催化剂有过氧化物酶和氯化血红素。异鲁米诺的量子产率较小,可以通过化学基团的修饰来改变它们的特性。22光泽精(3)在免疫分析中,这类化合物可作为酶转化

7、的光泽精在碱性介质中被氧化成N-甲基吖啶[9]底物,利用它的水解发光来测定金属离子。CS-酮,发出亮蓝色的光;最大波长为440nm,量子产DP是AMPPD的衍生物,它能被碱性磷酸酶催化率在001~002范围内。光泽精的发光反应要发光测定锌。求的pH较为严格,一般在01~10mol/L的强碱25金属配合物发光试剂溶液中进行,需单独加入。光泽精的反应时间较这类试剂包括联吡啶、邻菲咯啉及类似配体长,发光

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