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《虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、遗传HEREDITAS(Beijing)24(1):35～39,2002研究报告农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究1111,2111张艳贞,王罡,胡汉桥,魏松红,季静,王军军,李昌(1.解放军军需大学植物基因工程研究中心,吉林长春,130062;2.沈阳农业大学植保系,辽宁沈阳,110061)摘要:以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料,用带有质粒pGBIL04(Pactin-Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织,共培养3天后,在含PPT的培养基上连
2、续筛选培养3代,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体,结果还发现将共培养温度降到22℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。关键词:玉米;自交系;转基因;农杆菌;Bt;预培养;共培养温度;PCR中图分类号:Q785文献标识码:A文章编号:0253-9772(2002)01-0035-05TransferofInsecticidalProteinGenefromBacillusthuringiensisintoC
3、onventionalMaizeInbred-lineMediatedbyAgrobacteriumtumefaciens1111,2ZHANGYan2zhen,WANGGang,HUHan2qiao,WEISong2hong,111JIJing,WANGJun2jun,LIChang(1.ResearchCenterforPlantGeneticEngineering,QuartermasterofPLA,ChangchunJilin,130062,China;2.DepartmentofPlantProtectio
4、n,ShenyangAgricultureUniversity,ShenyangLiaoning,110061,China)Abstract:Excellentinbred-linesofmaize,340and4112,whichwereusedlargelyinhybridizedcombinationweretrans2formedwithAgrobacteriumtumefaciens.TheimmatureembryosandtheiroriginalcalliwereinfectedbyA.tumefaci
5、ensLBA4404containingplasmidpGBIL04.After3daysofco-cultivation,theimmatureembryosandcalliwerecontinuouslyselectedonthemediumcontainingphosphinothricin(PPT)for3generations,thenplantswereregenerated.ItwasprovedbyPCRanalysisthatthetargetBtgenehadbeenintegratedintoth
6、egenomeofregeneratedplants.Theresultsshowedthatfreshoriginalcallifromtheimmatureembryosafterpre-cultureweresuitableacceptors.Theresultsalsoshowedthatitcouldincreasethefrequencyofselectionbyproperlyloweringtheco-culturetemperatureto22℃.Keywords:maizeinbred-line;t
7、ransformation;Agrobacteriumtumefaciens;Bt;pre-culture;co-culturetemperature;PCR玉米螟俗称玉米钻心虫,除青海、西藏未见报道重,常年春玉米受害减产约10%,夏玉米减产约[1]外,在我国的华北、东北、华东及西北危害均十分严20%～30%。应用化学杀虫剂对玉米螟作用效收稿日期:2000-12-25修回日期:2001-9-25基金项目:“:国家植物转基因技术研究开发与中试基地建设”专项课题J99-B-001作者简介:张艳贞(1972-),女(汉),河
8、南荥阳人,硕士,助研,专业方向:植物基因基因工程E2mail:shenshen@mail.jl.cn通讯联系人:王罡(1964-),男,教授,专业方向:植物基因基因工程。电话:0431-7973911-65087,E2mail:wgtt@public.cc.jl.cn©1994-2010ChinaAcademicJournalEl
