微生物薯蓣皂苷糖苷酶的分离纯化的研究

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1、"微生物学杂志5##(年!!月第5(卷第"期FY8[>26YGW7X[Y97Y6Y?@>D&5##(]DL&5(>D&"微生物薯蓣皂苷糖苷酶的分离纯化的研究刘冰，王元好，胡湘春，鱼红闪，金凤燮（大连轻工业学院生物与食品工程学院，辽宁大连!!"##!）摘要产薯蓣皂苷酶的$%&$##’菌发酵液，通过分级沉淀的分离方法，经离子交换柱提纯分离，得到聚丙烯酰胺凝胶电泳单点的酶，其酶蛋白分子量为()*+，提纯酶最适酶反应温度为,#-，最适%.值为(&#。提纯酶不仅能水解薯蓣皂苷的鼠李糖基，也能水解薯蓣皂苷的葡萄糖基。关键词薯蓣皂苷；糖苷酶；纯化；分子量中图分类号/),"&01

2、文献标识码2文章编号!##(34#5!（5##(）#"3###"3#,!"#$%$&’($)*)%+$),&$*’,-%#)..$&#))#/’*$,.6789:;<，=2>?@+A;BCAD，.8E:A;GH;

3、CH$H%AOAS:D;PHSCDKSCAS

4、QC:’CK:NNHOH;S:ASH&2-34)#5,U:D$’:;；

5、疾病［!］。穿龙薯蓣也是高质量的薯蓣皂苷资源植物，薯蓣皂苷元是目前合成载体抗炎药、女用避孕药的重要合成原料［5］。最新的药理研究表明，其中所含有的薯蓣皂苷元具有抑制骨肉瘤细胞中环氧化酶（XYE$）的活性［1］，还具有降低胆固醇［,，(］，抗高脂血症［"，4］，刺激肝素细胞生长与调图6薯蓣皂苷化学结构控胆汁分泌［0，)］等作用，是目前备受关注的天然G:<&!JCH’CHP:$SOM$SO+’+OHDNU:D$’:;化合物之一。穿山龙的有效成分主要为甾体皂苷类，包括薯蓣皂苷（U:D$’:;），纤细皂苷（?OA’:LL:;）由于薯蓣皂苷口服后，经过消化系统微生物和水溶性皂

6、苷，总皂苷水解产生薯蓣皂苷元（U:D$B酶的作用水解糖基后，被吸收后发挥其药效；如果收稿日期：5##(3!!3#)作者简介：刘冰，女，在读硕士研究生。现从事微生物发酵及生物制品转化的研究。万方数据基金项目：国家自然科学基金项目（1#14!4,,、5#,4"#!4、1#,4##((）9期刘冰等：微生物薯蓣皂苷糖苷酶的分离纯化的研究;体外实现糖基水解，对中草药意义很大。本文主达到分离提纯的目的。所得各管提纯酶（每管收要研究微生物来源的薯蓣皂苷糖苷酶性质，探讨集845／<4’7）在紫外光-<$74处测吸光值。体外得到低糖基薯蓣皂苷酶解产物的可能。3!-!8酶活力的测定用$

7、!$-4>(／5#?.!$?@%AB)@%缓冲溶液溶解穿山龙底物皂苷，制成!材料与方法3=的底物溶液。取$!345穿山龙底物溶液，加!!!材料入$!345酶液，于/$6下反应，加入$!-45菌种"#!"$$%、薯蓣皂苷酶发酵液（粗薯蓣皂水饱和正丁醇终止酶反应，振荡，分层，取上层液苷酶）均由大连轻工学院生物与食品工程学院实作薄层层析检测，点样量为."5，展开槽中展开，验室提供。薯蓣皂苷标准品：由军事医学科学院显色、电脑扫描，以单位时间内的底物的转化率标马百平教授提供，层析板为&’(’%)*+(,-./是准检测酶活力。0+1%2产品。3!-!/酶最佳反应条件的确定采