广枣总黄酮对大鼠缺血心肌组织蛋白质表达的影响

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1、·1344·中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2006Nov;22(11):1344~8广枣总黄酮对大鼠缺血心肌组织蛋白质表达的影响1123张琪,杨玉梅,刘凤鸣,宋一亭(1.包头医学院心血管研究室,内蒙古包头014010;2.北京亿立生物技术研究所,北京100044;3.内蒙古中蒙医研究所,内蒙古呼和浩特010020)中国图书分类号:R2332;R282171;R28411;R322111;1.2药品和试剂TFC由内蒙古中蒙医研究所提R341;R39413;R542120513;R97716供,生药浓度为1

2、115kg·L-1,以芦丁计,总黄酮的文献标识码:A文章编号:100121978(2006)11-1344-05纯度为48%。尿素、蛋白酶抑制剂、Tris(三羟甲基摘要:目的探讨广枣总黄酮对缺血心肌的保护作用及其相氨甲烷)、HEPES(羟乙基哌嗪乙磺酸)CHAPS[32关蛋白表达谱的改变。方法应用表面增强激光解吸离子(32胆胺丙基)二甲氨基212丙磺酸〕均购自Sigma公化(surfaceenhancedlaserdesorption/lonization,SELDI)蛋白司。SPA购自Fluka公司。IMAC3、SAX2和NP20质芯片技术检测

3、了经广枣总黄酮处理后的缺血心肌组织和蛋白芯片由北京师范大学高等学校蛋白质组学研究未经广枣总黄酮处理后的缺血心肌组织中的蛋白质谱。用PHSII2C型蛋白芯片阅读机读取数据并进行比较分析。结果院提供。与未经广枣总黄酮处理后的缺血心肌组织相比,有7个蛋1.3仪器PHSII2C型蛋白芯片阅读机(美国Ci2白质在经广枣总黄酮处理后的缺血心肌组织中有变化,其中phergen公司),超声波破碎仪(美国思博明科学器有2个在广枣总黄酮处理后的缺血心肌组织中呈高表达,5材有限公司),BL2410生物信号处理系统(成都泰盟个蛋白低表达,其中有4个出现在IMAC3芯片上

4、,1个出现公司)。在SAX2芯片上。结论广枣总黄酮在缺血心肌组织中可2方法调节相关蛋白表达谱从而产生保护作用。2.1心肌缺血模型的建立20只大鼠,♂♀兼用,体重(215±30)g,随机分为对照组和给药组,每组关键词:广枣总黄酮;心肌缺血;蛋白质组-110只,大鼠以20ml·kg容量灌胃,对照组给予生-1理盐水,给药组给予广枣总黄酮23g·kg(按生药广枣为藏、蒙医习用药材,来源于漆树科南酸枣浓度计算),连续14d。d14给药1h后腹腔注射属植物南酸枣[choerospondiasaxillarisroxbburttet-13%戊巴比妥钠1ml·k

5、g麻醉,仰位固定,记录Ⅱhill]的干燥果实。广枣总黄酮(totalflavonesofCho2导心电图,分离颈总动脉,行气管插管术,连接动物erospondiasaxiarisfructus,TFC)为其活性成分,具有呼吸机,左侧第四肋间开胸,剪开心包,轻压胸壁挤多种生理活性,尤其对心血管系统有明显的作用。出心脏,结扎冠脉左前降支后迅速将心脏送回胸我研究室研究证实,TFC具有明显的抗心肌缺血损[4]腔,用BL2410生物信号处理系统监测缺血前后伤的作用,对实验性急性心肌缺血导致的多种房性[1~3]心电图变化。待心肌缺血5h后快速取出心脏,用和室

6、性心律失常具有明显的保护作用。为进一生理盐水灌注以清除血液成分,保存于液氮中待测。步探讨TFC抗心肌缺血损伤作用的物质基础,本实2.2细胞总蛋白的提取从液氮中取出心肌组织,验应用SELDI蛋白质芯片技术对TFC处理后与未称重,剪碎后加入5倍体积的细胞裂解液(8mol·处理心肌组织蛋白质表达的差异进行了比较研究。-1-1LUrea、4%CHAPS、40mmol·LTris2HClpH1材料-1714、1mg·L的Leupeptin和Aprotinin、011mmol1.1动物Wistar大鼠20只,由内蒙古大学实验-1·LPMSF),应用超声波破碎

7、仪于冰上将组织块动物中心提供,许可证号SCXK(蒙)2002-0001(清进一步破碎,小心匀浆,防止产生过多泡沫,放入离洁级)。心机中(14000×g)离心30min,取上清用BCA蛋收稿日期:2006-06-01,修回日期:2006-08-20白定量试剂盒的微量测试法测定总蛋白浓度,其余基金项目:国家自然科学基金资助项目(No30160102)上清分装于Eppendorf管中,置于-80℃以备用。作者简介:张琪(1980-),女,硕士生,Tel:047225991217,E2mail:2.3IMAC3蛋白芯片实验步骤在IMAC3蛋白Zhangq

8、i2018@yahoo.com.cn;-1芯片8个点(A2H)的表面加10μl100mmol·L杨玉梅(1959-),女,教授,硕士生导

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