应用elisa对畜产品瘦肉精残留的快速筛选

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1、万方数据第10卷第3期2006年9月河北农业科学JournalofHebeiAgriculturalSciencesV01．10No．3Sep．2006文章编号：1008．1631(2006)03-0068-04应用ELISA对畜产品瘦肉精残留的快速筛选左晓磊1，张峰孙，褚素巧1，刘海生1(1．石家庄市畜牧水产局，河北石家庄050000；2．河北省农林科学院粮油作物研究所，河北石家庄050031)摘要：应用竞争酶联免疫法(ELISA)，能够快速对猪尿、猪肝中的克伦特罗残留进行检测筛选，一般实验只需2～3h，而且准确性高和重复性强，检测费用相对低廉。关键词：ELI

2、SA；克伦特罗；残留；检测中图分类号：S．文献标识码：ATheQuickAnlysisonMethodClenbuteralRedidueofAnimalProductbyELISAZUOXiao．1eil，ZHANGFeng¨，CHUSu．qia01，LIUHai．shen91(1．AnimalHusbandryMarineProductsBureauofShijiazhuang，Shijiazhuang050000，China；2．InstituteofCerealand0ilCrops．HebeiAcademyofAgricultureandForestr

3、ySciences，Shijiazhuang050031，China)Abstract：p-hermone，cenbuteral，producedbytheadrenalglandiswideusedintheanimalproduction，butitisdangeroustopeopleshealthbecauseremainedintheorgnism．Alotofmethodswereusedanlysisclen。buteral．Anewandquickmethodofclenbuteraldetectionwasdevelopedinthisrepo

4、rtbyantigen—antibodyre’actionorELISAreaction．Keywords：ELISA；Clenbuteral(CLB)；Residues；Detection“瘦肉精”学名克伦特罗，属B一肾上腺类激素，是美国Cyanamid公司化学合成制得的一种呼吸系统药物，临床用于治疗哮喘病[I]。20世纪80年代初研究发现，将一定量的克伦特罗添加到饲料中，可显著促进动物生长和提高瘦肉率。20世纪90年代我国开始作为饲料添加剂引人并推广。但一连串的“瘦肉精”食物中毒事件发生后，克伦特罗成为世界上普遍禁用的添加剂[2，]。1997年以来，我国农业

5、部等相关部门多次发文，禁止生产和使用“瘦肉精”。但仍有很多瘦肉精中毒事件发生，严重威胁消费者的健康。因此检测动物产品及饲料中的瘦肉精具有重要意义。测定克伦特罗的方法有高效液相色谱一质谱联用法(HPLC．MS)、气相色谱．质谱联用法(GC．MS)和高效液相色谱法(HPLC)，这些都是比较传统的办法，目前仍作为确认方法，但由于检测仪器费用昂贵、步骤繁琐以及耗时较长，现已不适用于畜牧兽医部门的检测[4]。目前常用的是竞争酶联免疫法(ELISA)，运用抗原抗体反应的原理，能快速地对“瘦肉精”作出定量分析及快速筛选，一般实验只需2～3h，而且准确性高和重复性强，检测费用相

6、对低廉[5]。1材料与方法1．1材料1．1．1仪器酶标仪及酶标工作站(配备450nm滤光片，奥地利sunrise公司生产)，洗板机(te一收稿日期：2006-03．28作者简介：左晓磊(1978一)，男，石家庄人，硕士，主要从事动物营养及畜产品研究与检测工作。通信作者：张蜂(1976一)，男，河北邯郸人，硕士，主要从事动物营养研究。万方数据第3期左晓磊等：应用ELISA对畜产品瘦肉精残留的快速筛选·69·can)，回旋振荡器(江西金坛医疗器械厂生产)，微量可调移液器(单道20斗L、50IxL、100斗L和1000斗L，八道50～300lxL)，高速冷冻离心机(速

7、率>t3000r／min，GL-21LM，湖南星科)，氮吹仪(1TrL．DC，北京同泰联)，组织匀浆机(XHF．1，宁波新芝)，RIDAC，。柱，离心管(50mL)，滤纸(0．45“m)，酶标板(12孔×8孔，英国randox公司生产)。1．1．2试剂甲醇(分析纯)，HCl(50mmoL／L和10mmol／L)，KH：PO，缓冲液(50mmol／L和500mol／L，pH值均为3．0)，NaOH(1mol／L)。1．2方法1．2．1样品前处理(1)猪尿。取猪尿样品10mL，过滤或离心至清亮。(2)猪肝和猪肉。称取粉碎的猪肝或猪肉样品5g，与50mmol／LHCL

8、25mL混合，振荡1．5