早期肠内营养在大鼠急性重症胰腺炎肠道免疫屏障中的作用及其机制的实验研究

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1、中图分类号：R657.5+1硕士学位论文早期肠内营养在大鼠急性重症胰腺炎肠道免疫屏障中的作用及其机制的实验研究院（系）、所临床医学院研究生姓名赵军学科、专业外科学导师姓名李波教授二Ο一三年四月目录1早期肠内营养在大鼠急性重症胰腺炎肠道免疫屏障中的作用及其机制的实验研究…………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………31.3前言……………………………………………………………51.4材料与方法……………………………………………………71.5结果……………

2、………………………………………………121.6讨论……………………………………………………………241.7结论……………………………………………………………301.8参考文献………………………………………………………311.9英汉缩略词对照表……………………………………………352致谢……………………………………………………………363TLR4与重症急性胰腺炎（综述）……………………………39早期肠内营养在大鼠急性重症胰腺炎肠道免疫屏障中的作用及其机制的实验研究摘要目的：通过检测早期肠内营养对牛黄胆酸钠诱导大鼠重症急性胰腺炎模型的血清淀粉酶(AMY

3、)、血糖(GLU)、静脉血中内毒素的含量，末段回肠和结肠peyer结MAdcAM-1分子(mucosaladdressincelladhesionmolecule-1)CD4+、CD8+含量。和大鼠门静脉血、胰腺、肺脏、肠系膜淋巴结的细菌培养。以及大鼠肠道的TLR4表达，观察早期肠内营养在大鼠重症急性胰腺炎肠道免疫屏障里的功能和研究EEN功效原理。方法：把成年身体状况良好的60只雄性大鼠体重约为300克左右，随机分成三组，每组20只大鼠。即假手术组(SO组)：开腹后仅轻轻翻动十二指肠及胰腺组织后关腹，不作处理。将3.8％牛磺胆酸钠lml从大鼠胰腺被

4、膜下各点徐徐匀速注入胰腺从而完成动物模型建立。造模成功后按组分别给予肠外营养和肠内营养。肠外营养组(TPN组)，造模后12小时，经颈外静脉置管输注肠外营养液。肠内营养组(EEN组)，造模12小时后，经胃，空肠做空肠造瘘管，予以肠内营养。各组于造模后一天，经SD大鼠颈静脉取血，检测血清淀粉酶(AMY)、血糖(GLU)水平。肠外营养、肠内营养持续给予五天，第六天两组分别统计SD大鼠死亡率，随即处死大鼠并收集标本，胰腺组织HE染色后行光镜病理学检查。空肠、回肠、结肠HE染色后观察肠粘膜形态学。免疫组化法测定末端回肠和Peyer结肠道的1MAdcAM-1、

5、CD4+、CD8+的含量。Westenblot法测定SD大鼠肠道组织TLR4的表达。SD大鼠静脉血检测内毒素含量。取SD大鼠门静脉血、胰腺、肺脏、肠系膜淋巴结做细菌培养，检测细菌移位率。此课题为四川省绵阳市中心医院赵平武教授申请的四川省应用基础研究的课题。结果：(1)各组SD大鼠5天的生存率：假手术组(SO组)SD大鼠全部存活生存率是100％，死亡率为零；肠外营养组(TPN组)5天死亡率为50%，早期肠内营养组(EEN组)5天死亡率为25%，S组和其它实验组的死亡率的对照存在明显差异(P<0.01)。TPN和EEN组的死亡率对照无明显差异无统计学意

6、义(P=0.0847)。证明EEN是安全可行的。(2)SAP下SD大鼠血清淀粉酶改变：TPN、EEN组血淀粉酶含量在建模24小时后都明显上升，与SO组对照有明显差异(P<0.01)。在建模24小时后，EEN组和TPN对照，血清淀粉酶含量降低，有统计学意义(P<0.01)。(3)血糖变化：造模后TPN、EEN组血糖水平在建模24小时后均显著升高，与SO组比较有显著性统计学差异(P<0.01)；在建模24小时后，EEN组与TPN组比，血糖含量无明显变化，但有显著统计学差异(P<0.01)。(5)胰腺组织学评分：TPN、EEN组建模5天后所采集标本组织学

7、评分与SO组相比，均明显升高。与S组比较有显著差异性(P<0.01)。而TPN、EEN组相比，TPN组评分高于EEN组而且有显著性统计学差异(P<0.01)。(6)各组SD大鼠静脉血内毒素含量测定：本实验中EEN、TPN两组动物在建立SAP模型5天后血内毒素水平明显比SO组升高，说明EEN、TPN两组均有不同程度的肠道屏障损伤，而EEN组血浆内毒素含量与TPN组对比2明显偏低，具有统计学意义，(P<0.05)。说明SAP早期肠内营养有效降低了SD大鼠SAP时肠粘膜的通透性，有效保护了其肠粘膜屏障。(7)胰腺、肺脏、肠系膜淋巴结细菌培养和细菌易位率测

8、定：细菌类型主要为革兰阴性菌，其中大肠杆菌占85.7％(12/14)。各种细菌易位率EEN组远低于TPN组，具有统计学意义