慢病毒转染胸苷磷酸化酶基因对5'-脱氧氟尿苷抑制人结肠癌细胞活性的影响

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1、中文摘要+分类号：R735.35密级：一般UDC：616.345编号：2010212488广州医学院硕士学位论文慢病毒转染胸苷磷酸化酶基因对5'-脱氧氟尿苷抑制人结肠癌细胞活性的影响研究生：高庆导师：张继民教授申请学位级别：医学硕士年级：二零一零级学位专业：外科学研究方向：胃肠道肿瘤治疗论文提交日期：2013年5月论文答辩日期：2013年5月学位类型：医学科学学位学位授予单位：广州医学院答辩委员会主席：评议人：2013年5月中文摘要广州医学院硕士学位论文慢病毒转染胸苷磷酸化酶基因对5'-脱氧氟尿苷抑制人结肠癌细胞活性的影响Influenceoflen

2、tiviraltransfectionwiththymidinephosphorylasecDNAontheresistanceof5'-DFURtocoloncancercellactivity学位专业：外科学研究生：高庆导师：张继民教授二〇一三年五月中文摘要目录中文摘要………………………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………………………3前言……………………………………………………………………………………5材料和方法……………………………………………………………………………7结果………

3、…………………………………………………………………………12讨论…………………………………………………………………………………16结论…………………………………………………………………………………22参考文献……………………………………………………………………………23文献综述……………………………………………………………………………27学习期间发表的论文………………………………………………………………33致谢…………………………………………………………………………………39学位论文原创声明…………………………………………………………………40学位论

4、文知识产权权属声明………………………………………………………40关于学位论文使用授权的说明……………………………………………………40中文摘要英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称TPthymidinephosphorylase胸苷磷酸化酶5-FU5-fluorouracil5-氟尿嘧啶5’-DFUR5'-deoxy-5-fluorouridine5'-脱氧氟尿苷cDNAcomplementaryDeoxyribonucleic反转录脱氧核糖核酸acidMTT3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,53-（4，5-二甲基噻唑-2）

5、-diphenyl-tetrazoliumbromide-2，5-二苯基四氮唑溴盐IC5050%inhibitoryconcentration半数抑制浓度HPLChighperformanceliquid高效液相色谱法chromatographyPolybrenehexadimethrinebromide聚凝胺BSDBlasticidin杀稻瘟菌素DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜mRNAmessengerribonucleicacid信使核糖核酸PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液中文摘要慢病毒转染胸苷

6、磷酸化酶基因对5'-脱氧氟尿苷抑制人结肠癌细胞活性的影响学位专业：外科学研究生：高庆导师：张继民教授摘要研究背景胸苷磷酸化酶（thymidinephosphorylase，TP）即血小板衍化血管内皮细胞生长因子（platelet-derivedendothelialcellgrowthfactor，PD-ECGF）是嘧啶核苷代谢过程中的一个关键酶，能可逆性催化胸腺嘧核苷转化生成胸腺嘧啶和2-脱氧-D-核糖-1-磷酸，其在体内具有明显的促血管新生和抗细胞凋亡作用。TP同时又是5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）前体药物5'-脱氧氟尿苷

7、（5'-deoxy-5-fluorouridine，5’-DFUR，氟铁龙）和卡培他滨（capecitabine，希罗达）等转化为5-FU的一个关键限速酶，与肿瘤的化疗关系密切。已经证实，在肿瘤组织中TP的活性明显高于周围的正常组织，但在不同的肿瘤组织中，TP表达的具体部位、活性和作用却不尽相同。近年来，很多国内外学者研究和我们的前期实验研究均发现人结直肠癌组织及肝转移组织中TP并非癌细胞而主要由间质的肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associatedmacrophages，TAM）表达。在结肠癌细胞不表达TP的情况下应用5-FU前体药物，5’-DF

8、UR在组织-细胞中如何转化，是目前仍未解决的问题。而提高结直肠癌组织中尤其是癌细胞中TP的表达水平，对改善结