喹赛多对c2c12肌管基因与蛋白表达的影响研究

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1、密级华中农业大学硕士学位论文喹赛多对C2C12肌管基因与蛋白表达的影响研究TheEffectsofCyadoxonExpressionofGenesandProteinsinC2C12Myotubes研究生：学号：指导教师：指导小组：李文静2010302110122戴梦红副教授袁宗辉教授戴梦红副教授王旭副教授程古月讲师专业：基础兽医学研究方向：兽医药理学与毒理学获得学位名称：农学硕士获得学位时间：2013年12月华中农业大学动物科技学院动物医学院二O一三年十二月课题名称：自选承担单位：国家兽药残留基准实验室(HZAU)／农业部食品

2、安全评价重点开放实验室华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文}如需保密，解密时间年月日是否保密p⋯声明’煳本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表研究生签名：套王静时间：功f牛年1月I]日学位论文使用授权书本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇

3、编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论文)在解密后适用于本授权书。学位论文作者签名：李王亳争锄签名：辩钆签名日期：Ⅵf(P年1月I_7日签名日期：内lp年『月I髟日注：请将本表直接装订往学位论文的扉页丰¨目录之间喹赛多对C2C12肌管的基因和蛋白表达的影响研究目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1Abstract．．．．．．．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯．．．．．⋯．．⋯．⋯⋯．⋯．4缩略语表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．81．1喹赛多促生长作用研究概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．2骨骼肌生长相关研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．2．1骨骼肌的生长特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．

5、91．2．2出生后动物体肌纤维的生长机制研究概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。91．2．3出生后肌肉内转录与蛋白质周转的调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．3研究思路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。111．4研究内容与目标⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。122材料方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．142．1细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．142．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。142．3主要仪器⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。162．4主要试剂的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．172．5细胞培养及冻存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．6免疫荧光染色法测定C2C12细胞分化阶段⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．7C2C12肌管敏感药物作用浓度与时间的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．202．7．1BCA法测定喹赛多作用的C2C12肌管总蛋白浓度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．202．7．2喹赛多作用C2C12肌管MyHC基因表达量变化的测定⋯⋯⋯⋯⋯．212．8C2C12

7、肌管表达谱基因芯片检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232．8．1总RNA的提取和纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．242．8．2eDNA合成与aRNA的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．8-3aRNA纯化和片段化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一242．8．4芯片杂交⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．8．5芯片洗染扫描⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．8．6数据处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．252．8．7实时荧光定量PCR验

8、证部分差异基因表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一25华中农业大学2013届硕士学位论文2．9双向电泳技术检测及质谱鉴定喹赛多作用C2C12肌管差异蛋白⋯⋯⋯⋯252．9．1细胞处理及分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．9．2细胞总蛋白的