内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌超抗原基因分布情况及耐药性研究

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1、分类号TP391.41学校代码10129UDC35.140学号2010201036内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌超抗原基因分布情况及耐药性研究DistributionofSuperAntigenGenesandAntimicrobialResistanceofPathogenicStaphylococcusIsolatedfromDiaryCowwithEndometritisinInnerMongolia申请人：李志芳学科门类：农学学位专业:基础兽医学研究方向：兽医药理学与毒理学指导教师：李培锋教授论文提交日期：二〇一三年六月摘要目的：了解内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌超抗原基因

2、的分布及其耐药情况，为指导该地区有效治疗奶牛子宫内膜炎提供可靠的科学依据。方法：本研究对从内蒙古呼和浩特、包头、赤峰、乌兰察布等地奶牛养殖场患子宫内膜炎的奶牛中采集到的100份子宫分泌物进行了葡萄球菌分离试验，在此基础上，采用形态学观察和分子生物学方法，对其进行了鉴定；采用PCR技术检测了分离葡萄球菌的超抗原基因分布情况；采用微量肉汤稀释法和PCR技术分析了分离葡萄球菌的耐药性。结果：1.本试验共分离到60株（60%）葡萄球菌，其中金黄色葡萄球菌32株（53.3%），凝固酶阴性葡萄球菌28株（46.7%）。在凝固酶阴性葡萄球菌中，产色葡萄球菌11株（18.3%），腐生葡萄球菌7株（11.7%）

3、，表皮葡萄球菌3株（5.0%），松鼠葡萄球菌2株（3.3%），头葡萄球菌2株（3.3%），溶血葡萄球菌2株（3.3%），福氏葡萄球菌1株（1.7%）。2.在检测的12种肠毒素中，SEJ的携带率最高（37/61.7%）；SEA（2/3.3%）、SEB（2/3.3%）及SEE（2/3.3%）的携带率最低。60株葡萄球菌分离株中，新型肠毒素的平均携带率（63.3%）与传统肠毒素的平均携带率（15.0%）相比差异极显著（p<0.01）。60株葡萄球菌分离株中多呈现一株菌同时携带多种超抗原基因，在32株金黄色葡萄球菌中，一株菌最多携带7种超抗原基因，携带率为12.5%；在28株凝固酶阴性葡萄球菌中，一株

4、菌最多携带4种超抗原基因，携带率为25%。3.分离到的葡萄球菌对青霉素耐药率最高（96.7%），对万古霉素最敏感（0%），有多重耐药菌株检出，范围在2耐～13耐之间；分离菌中BlaZ携带率达98%，金黄色葡萄球菌中未检出mecA，但凝固酶阴性葡萄球菌中mecA携带率为53.6%。结论：内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌有12种肠毒素及eta，etb，TSST-1检出，其中SEJ的携带率最高；奶牛子宫内膜炎葡萄球菌对临床常用抗菌药物均有不同程度的耐药性，且葡萄球菌对β-内酰胺类耐药率较高，多重耐药性现象极其严重。关键词：奶牛；致病葡萄球菌；超抗原基因；耐药性；内蒙古地区Distribution

5、ofSuperAntigenGenesandAntimicrobialResistanceofPathogenicStaphylococcusIsolatedfromBovineEndometritisinInnerMongoliaAbstractObjective：ToinvestigatethedistributionofsuperantigenandantimicrobialresistanceofpathogenicStaphylococciisolatedfromdiarycowswithendometritisinvariousregionsofInnerMongolia.Meth

6、od：Thestudywastocollect100samplesofbovineendometritisfromdairyfarmsinInnerMongoliaregion,whichwereHohhot,Baotou,Chifeng,Wulanchabu.Moreover，weisolatestaphylococcusfrom100hysteraexcretioncollected.Onthisbasis,morphologyobservationandmolecularbiologymethodwereusedtoidentifyStaphylococcus.PCRmethodwasu

7、sedtoamplifysuperantigengenesfromisolatedstrains.MicrodilutionbrothandPCRmethodwereusedtotoanalyzedrugresistanceofisolatedStaphylococcus.Results：1.thesestaphylococcusisolateswerestaphylococcusaureus(3