三种抗酸染色痰涂片前处理方法的效果评价

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1、答辩委员会主席：夏鏖挞塑拯主国瘗痘亟随控鱼』虫：坠答辩委员会成员：拯瞳蝰塾拯虫笠塞纳刖童太堂奎丕塾拯宝这直瘥痘亟随撞鱼』主!坠燮丞基数拯湿趔医抖太堂奎鱼塾拯．湿划医型太堂温州医学院硕士学位论文目录I吣吣哪010吣吣眦唧哪㈣Y2397561缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36附录⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯··39致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯··40综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53温州医学院硕士学位论文缩略词表简写英文全称中文全称AFBbp℃ddH20DNAEBghkPaL．JMgS04’7H20“Lp．w·裔矗pw／cm2minmLmmmol／LMTBCNTMPCRKH2P04印mNaClSDSNaOClN

3、a2S203’5H20SSCH2S04TBEacid一士’astbacillusbasepaircelsiustemperaturedoubledistilledwaterdeoxyribonucleicacidethidiumbromidegrammehourkilopascalLowenstein．Jensenmagnesiumsulfateheptahydratemicrolitermicrowatt‘secondpercentimetersquaredmicrowattpercentimetersquaredminutemillilitermi

4、llimetermoleperlitreMycobacteriumtuberculosiscomplexNontuberculousMycobacteriapolymerasechainreactionpotassiumdihydrogenphosphaterotationperminutesodiumchloridesodiumdodecylsulfatesodiumhypochloriteSodiumThiosulfatePentahydratestandardsalinecitratesulphuricacidTris．brate．ED7力酸杆菌

5、基对氏温度蒸馏水氧核糖核酸化乙锭斯卡培养基七水合物硫酸镁微升微瓦特·秒每平方厘米微瓦特每平方厘米分钟毫升毫米摩尔每升结核分枝杆菌复合群非结核分枝杆菌聚合酶链反应磷酸二氢钾转每分氯化钠十二烷基硫酸钠次氯酸钠五水合硫代硫酸钠标准枸橼酸盐溶液硫酸Tris一硼酸盐缓冲液Z—NZiehl-Neelsen萋尼氏染色．2．时帕氏抗碱摄双脱溴克小干罗温州医学院硕士学位论文中文摘要目的：本研究通过采用紫外线照射法、次氯酸钠溶液消毒法及高压蒸汽灭菌法三种方法对抗酸染色痰涂片进行前处理，评价其对抗酸染色镜检的影响及其消毒效果。为资源有限、处于结核病职业暴露高危环境中的基层实

6、验室工作人员进行抗酸染色痰涂片镜检，提供简单、经济、实用的方法，灭活涂片中分枝杆菌，以提高基层实验室生物安全。方法：1．收集萋尼氏抗酸染色阳性的痰液，并测定紫外线照射距离、辐照强度，以及次氯酸钠溶液有效氯浓度。2．痰涂片抗酸染色镜检及分枝杆菌培养：将痰液充分混匀后分为四份，分别用于对照组、紫外线照射组、次氯酸钠溶液消毒组及高压蒸汽灭菌组。对照组首先采用直接涂片方式制备2张涂片，一张进行抗酸染色，作为涂片镜检对照；一张经火焰固定后刮取痰膜进行分枝杆菌培养：剩余痰液接种改良罗氏培养基进行分枝杆菌分离培养，作为培养对照。紫外线照射组将涂片置于生物安全柜内紫外

7、灯下，分别照射lOmin、20min、40min、60min、80min后进行抗酸染色镜检及分枝杆菌培养。次氯酸钠溶液消毒组的痰液因向痰液中加入等量次氯酸钠溶液消化处理lO～15min后，集菌方法不同，分为两小组，一组离心法是加入等量的蒸馏水，混匀，然后以2500rpm速度离心15min；一组沉淀法则是加蒸馏水至15mL，混匀，室温中静置过夜(15h～18h)。两组集菌后取沉淀进行涂片染色镜检以及接种培养。高压蒸汽灭菌组将痰液放入高压蒸汽灭菌锅中(压力103．4kPa，温度121℃)，灭菌20min后以2500rpm速度离心15min，取沉淀进行涂片抗

8、酸染色镜检。因高压蒸汽灭菌可杀灭所有微生物，故高压灭菌后的痰液不再进行培养工作。3．菌种鉴定：