皖北麦田土壤解磷菌筛选及解磷能力初步研究 毕业论文

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1、本科生毕业论文（设计）题目:皖北麦田土壤解磷菌筛选及解磷能力初步研究姓名:学院:城建与环境学院专业:农业资源与环境班级:2010级2班学号:2204100223指导教师:职称:教授2014年5月25日安徽科技学院教务处制8目录摘要2关键字2引言21材料和方法21.1材料21.1.1土样21.1.2培养基21.1.3磷源物质31.2方法31.2.1解磷菌筛选31.2.2解磷菌在固体培养基上溶磷能力的测定31.2.3解磷菌在液体培养基上溶磷量的测定32结果和讨论32.1菌落形态观察32.2菌株在不同磷源固体培养基上的生长活力32.3菌株在三种液体培养基上的溶磷量42.4三种液

2、体培养基中的pH与溶磷量的关系53结论6致谢6参考文献7英文翻译88皖北麦田土壤解磷菌筛选及解磷能力初步研究摘要：采用Pikovskay培养基从临泉麦田中筛选出具有高效解磷能力的菌株四株，将筛选出的菌株在三种不同磷源（磷酸三钙、磷矿粉、卵磷脂）的固体培养基和液体培养基中培养。在Pikovskay平板3天后测量解磷菌D/d为1.27~1.65，在液体摇瓶培养中，其解磷率为0.13~20.20mg/L。其中310—1对三种磷源都有较高的解磷效果，有较高发展潜力。而303—3和310—3分别对磷酸钙和卵磷脂有较高解磷率，可作为专性解磷菌株配合单一磷肥施用。关键字:解磷菌；不同磷

3、源；溶磷能力引言：磷是作物生长必不可少的营养元素之一，在作物生长的各个阶段都扮演重要角色。根据报道我国约75%的耕地土壤缺磷。土壤中95%的磷以无效态形式存在，植物难以直接利用。根据报道，土壤中平均含磷量约0.12%，而其在土壤溶液中的含量仅为0.005~1.0mg/kg。作物当季磷肥利用率仅为5%~10%，大部分磷作为无效态在土壤中累积[1,2]。由于长期施用磷肥，土壤磷库充足而磷流不足是目前耕地土壤的现状。土壤中含磷化合物以有机态和无机态的形式存在。无机态磷约占30%~50%，主要分为闭蓄态磷和非闭蓄态磷。闭蓄态磷是指磷酸铁和磷酸铝被氧化铁形成的酸膜包敝，活性较低，难

4、以被植物利用。非闭蓄态磷主要指铁铝钙的三种磷酸盐，在一定条件下他们可以被释放出来供植物利用[3]。土壤中有机态磷约占30%~50%，主要包括肌醇类，核酸，磷脂，磷蛋白，磷糖等。土壤中的有机态磷5%~10%存在于微生物体内，30%~50%以植酸钙镁的形式存在。土壤很多因素影响磷的利用，其中微生物对磷的有效化影响很大。事实上土壤中存在大量的解磷微生物，能够将无效态磷转化为有效态磷（可溶性磷）。我国旱地土壤的解磷菌平均为107cfu/g,约占总微生物的27%~82%[5—8]，其中根际土壤的解磷菌数量要比非根际土壤的解磷菌数量高一到两个数量级解磷菌的分布表现出强烈的根际效应。研

5、究表明不同解磷微生物对不同磷源的喜好不尽相同[9—11]。目前科学家已经筛选出许多高效菌株开发出解磷菌制剂，并成功用于生产有效提高作物产量。如东北农科所将巨大芽孢杆菌制成菌剂在黑钙土和非黑钙土上施用，不同的作物增产幅度不同，平均增产黑钙土为13.5%，非黑钙土为11.7%[3]。本文尝试从另一方面出发，利用改良的Pikovskaya培养基筛选麦田土壤解磷菌，来探讨其对三种磷源——磷矿粉，磷酸钙，卵磷脂的解离能力的差异。1材料和方法：1.1材料1.1.1土样：临泉小麦土壤。1.1.2培养基：分离培养基（改良的Pikovskaya培养基）:葡萄糖10g，Ca3(PO4)25g

6、，硫酸铵0.5g，氯化钠0.2g，硫酸镁0.1g，氯化钾0.2g，酵母膏0.5g，硫酸锰0.002g，硫酸亚铁0.002g，0.4%溴酚蓝（pH6.7）6ml，琼脂20g，蒸馏水1000ml，pH7.0—7.2。液体培养基：Pikovskaya培养基：葡萄糖10g，Ca3(PO4)25g，氯化镁5g，硫酸镁0.25g，氯化钾0.2g，硫酸铵0.1g，蒸馏水1000ml，pH7.0。1.1.3磷源物质：无机磷为磷酸三钙(Ca3(PO4)2)，磷矿粉:主要成分为氟—磷灰石。有机磷为卵磷脂。上述均为市售分析纯试剂。81.2方法1.2.1解磷菌筛选：称取新鲜土壤10g置于内含玻璃

7、珠和90ml无菌水的250ml的三角瓶中，170r/min振荡30min，然后按10-5、10-6、10-7梯度进行稀释，各取0.1ml涂布于分离培养基上，每个梯度重复3次，于30℃培养3~5d，挑取有较大溶磷圈的菌落进行纯化保存。用接种环将上述纯化保存的生长良好的解磷菌，使用平板划线法分别接种于pikovskaya培养基中，培养3d，选取生长良好溶磷圈明显的菌落，观察记菌株菌落特征及生长情况。1.2.2解磷菌在固体培养基上溶磷能力的测定：用灭过菌的牙签将上述菌株点接在分别以磷酸三钙、磷矿粉和卵磷脂为唯一磷源的培养中，磷源为卵