食品生物技术---麻明友老师

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1、1.什么是报告基因?答:基因工程中利用载体上引入的一些具有特殊标志意义的基因,用于证明载体已进入宿主细胞,并可用来将含有目的基因的宿主细胞从其他细胞中识别区分甚至挑选出来,这种具有标志意义的基因称为报告基因或标记基因。2.什么是融合蛋白?答:在基因工程迅速发展的基础上,有目的地把两段或多段编码功能蛋白的基因连接在一起,进而表达所需蛋白,这种通过在人工条件下将两个或多个基因的编码区首尾连接,由同一调控序列控制构成的基因表达后所得的蛋白质产物称为融合蛋白。3.酶工程、酶分子修饰的概念答:酶工程:通过酶或微生物细胞,动植物细胞,细胞

2、器等在一定的生物反应装置中,利用酶所具有的特殊生物催化功能,借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的工程技术科学。酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程。4.发酵工程概念答:又称微生物工程,指利用微生物的生长繁殖和代谢活动,并通过现代工程技术,大量生产人们所需产品过程的理论和工程技术。5.空罐灭菌、“三路进汽”的概念答:空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、还是尿素(或液氨)罐、消泡罐,当培养基(或物料)尚未进罐前对罐进行预先灭菌,我们称为空罐灭菌。三路进汽:

3、直接蒸汽从通风口、取样口和出料口进入罐内直接加热,直到所规定的温度,并维持一定的时间。这就是所谓的“三路进气”。6.植物细胞的脱分化概念答:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。7.植物体细胞杂交的概念答:将不同种植物的体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。1.pBR322的宿主细胞是什么?答:大肠杆菌。2.蛋白质工程是在深入了解蛋白质结构与功能关系的基础上,利用哪些方法有目的地改造蛋白质,使之性能得到改善?答:化学和分子生物学方法。3.蛋白质理性分子设计的

4、前提是什么?答:充分了解结构与功能的关系。4.蛋白质理性分子设计需要考虑的因素有哪些?答:氨基酸的性质;肽链特性;蛋白质构象的特点;蛋白质分子间的作用;蛋白质分子内的作用。5.蛋白质定向进化方法有哪些?答:DNA改组、容错PCR、体外随机引发重组、过渡模板随机嵌合生长、交错延伸。6.食品蛋白质化学改性方法有哪些?答:包括酸碱化、酰化、脱酰胺、磷酸化、糖基化(即美拉德反应)等方法。7.固态发酵的主要工程技术问题有哪些?答:大规模生产时的散热比较困难,参数检测如PH值、温度、菌体增殖量、产物生产量。8.发酵动力学内容包括哪些?答:

5、菌体比生长速率、碳源利用比速率、产物形成比速率9.属于非机械搅拌发酵罐有哪些?答:鼓泡式发酵罐、气升式发酵罐、液提式发酵罐10.目前发酵工业主要的生产方式是?答:液体和固体发酵、分批发酵和连续发酵。11.细胞工程的核心技术是什么?答:细胞融合技术12.诱导细胞融合的诱导剂有哪些?答:仙台病毒,聚乙二醇,电融合。1.基因工程的DNA聚合酶有几类?主要有哪些活性?答:(1)依赖于DNA的DNA聚合酶A、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ;活性:①5’→3’DNA聚合酶活性,以单链DNA为模板,以带3’自由羟基的DNA片段为引物;②5’→3’外

6、切核酸酶活性,从5’端既降解双链DNA,也降解RNA-DNA杂交体中的RNA链(RNA酶H活性);③3’→5’外切核酸酶活性,底物为带3’自由羟基的双链DNA或单链DNA。B、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段;具有两种活性:①5’→3’DNA聚合酶活性;②3’→5’外切核酸酶活性C、耐热的DNA聚合酶;具有一种活性:5’→3’DNA聚合酶活性(2)依赖于RNA的DNA聚合酶;活性:①5’→3’DNA聚合酶活性,以RNA或者DNA为模板,以带3’自由羟基的RNA或DNA片段为引物;②RNA酶H活性,即5’→3’外切核糖核酸酶活性,特

7、异地降解RNA-DNA杂交体中的RNA。(3)末端脱氧核苷酸转移酶;活性:即末端转移酶活性,在二价阳离子存在下,其催化dNTP加于DNA分子的3’-羟基端。2.基因工程中主要使用的是哪类限制性内切酶,为什么?答:①Ⅰ型酶分子质量较大,是多聚体蛋白质,具有切割未经修饰的DNA的功能;②Ⅱ型酶是一类分子量较小的单体蛋白,作用时需在镁离子存在便可在特殊位点切割DNA,产生具有黏性末端或其他形式的DNA分子片段。③Ⅲ型酶属双功能酶,有两种不同亚基,识别位点无规律,也需要较多的辅助因子参加。3.常用目的基因制备的方法及其原理?答:生物学

8、方法;化学合成法;基因文库法;利用PCR扩增法。原理:①生物学方法是采用基因工程手段把染色体DNA用限制内切酶切割,将所有片段都连接到某种载体上,转入大肠杆菌中增殖,再用适当方法来筛选含该基因的重组体菌落,从重组题细菌提取DNA,经酶切后得到目的基因。②化学合成法是以单核苷酸

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