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时间:2019-03-04
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1、河南中医学院2013届硕士研究生学位论文冬凌草品质评价研究生姓名:宋君导师:陈随清教授指导组成员:王红霞教授代丽萍副教授王利丽学科、专业:中药学所属院、系:药学院中国·郑州2013年5月08日硕士学位论文原创性声明本人所呈交的硕士学位论文,是在导师陈随清教授(或主任医师、主任药师、研究员等)的指导下,独立进行科学研究工作所取得的成果。除文中已特别加以注明引用的内容外,论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本
2、声明的法律结果由本人承担。特此声明。论文作者(签名):年月日硕士学位论文使用授权声明本人已完全了解河南中医学院有关保留、使用硕士学位论文的相关规定,同意学校保留或向国家有关部门、机构送交本学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权河南中医学院可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编本论文(注:保密论文在解密后适用本授权声明)。特此声明。论文作者(签名):导师(签名):年月日年月日目录摘要…………………………………………………………………………
3、…………1前言……………………………………………………………………………………4实验研究………………………………………………………………………………7第一部分………………………………………………………………………………7不同地区冬凌草有效成分品质评价…………………………………………………71仪器与材料………………………………………………………………………….72方法与结果………………………………………………………………………….83讨论………………………………………………………………………………...29第二
4、部分……………………………………………………………………………..31不同地区冬凌草随机扩增多态性DNA分子标记………………………………..311仪器与材料………………………………………………………………………...312方法与结果………………………………………………………………………...323讨论………………………………………………………………………………...39参考文献……………………………………………………………………………..40致谢……………………………………………………………………………………
5、…41附录1图片及表格………………………………………………………………….42附录2综述………………………………………………………………………..…61摘要摘要目的:为了掌握不同地区冬凌草的品质,明确不同地区冬凌草有效成份含量及遗传基因的差异,准确对冬凌草进行品质评价,为冬凌草资源的保护、科学开发和合理利用提供科学依据。方法:通过HPLC法对不同地区的冬凌草的有效化学成分进行含量测定;通过RAPD(随机扩增多态性DNA)分子标记探讨不同地区冬凌草的遗传分化关系。结果:1、不同地区冬凌草有效成分品质评价通过HP
6、LC法测定对不同地区冬凌草中有效成分冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸含量,热浸法测定指标性成份醇溶性浸出物含量。各化学成分含量测定的结果输入统计计算软件SPSS17.0进行聚类分析及主成分分析。聚类分析结果显示,不同地区冬凌草有效成分差异明显,表现为品质差异与地理隔离不成比例,地理分布相近的冬凌草品质差别很大,而有些地理分布远的冬凌草可能由于生长环境相似,差别反而小。主成分分析结果表明,河南与山西交界的太行山区南部品质排名较靠前,其中淇县、济源的最优。影响冬凌草品质的主要因素是冬凌草甲素和迷迭香酸的含量。2、
7、不同地区随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记提取冬凌草基因组DNA,并对RAPD-PCR反应条件进行优化,:通过利用48个10bp的随机引物对31份不同地区冬凌草种质资源材料RAPD分析,探讨不同地区冬凌草之间的遗传分化关系。从中筛选出10条进行扩增,建立了冬凌草RAPD指纹图谱,计算遗传距离,绘制遗传关系树状图。结果表明,不同地区冬凌草遗传分化较大,其中河南鲁山和山西夏县遗传距离最大。结论:结合不同地区冬凌草品质的评价和RAPD分子标记的分析,可以明确不同产地冬凌草品质差别较大。为保护冬凌草资源、合理开
8、发利用及其药材质量的综合评价提供科学依据。关键词:冬凌草,含量测定,种质资源1冬凌草品质评价ResearchofRabdosiaRubescensQualityEvaluationsongjun(ScienceofChineseMateriaMedica)DirectedbyChenSuiqingObjective:Inordertomasterthequalityofrabdosiarubesce
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