临床应用prp制备方法的比较研究

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1、中图分类号密级临床应用PRP制备方法的比较研究AcomparativestudyofclinicalapplicationofPI冲preparationmethods计：学位论文：28页表格：3个插图：14幅秦秀仙指导教师：胡刚教授申请学位级别：硕士学位学科(专业)：外科学培养单位：大连医科大学附属第一医院完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：附件1：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包

2、含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作毒签名：纽附件2：关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√刀)：1．保密口，在一年解密后适用本

3、授权书。2．不保密口。作者签名：觞导师签名：份卅日期山f乡年卵踟日期：20／；年j1踟目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOOOOIOO⋯⋯5／＼—1L——L(一)刖f舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯·5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1

4、实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3实验仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅵ61．4主要试剂及配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．1兔脂肪来源干细胞的分离与培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．2PRP的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．3兔脂肪来源干细胞的增殖实验(CCK．8)⋯⋯⋯⋯102．4双抗体夹心检测PDGF—AB的浓度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOOO⋯⋯⋯

5、⋯111．原代及传代细胞形态⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．ADSCs诱导染色⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯123．全血和PRP血小板计数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯134．血小板回收率的计算⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯135．兔脂肪来源干细胞的增殖实验的结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯136．双抗体夹心(ELISA法)检测PDGF—AB的浓度的结果⋯14(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18三、综述⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(一)综述正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28大连卤斡大学硕士学位论文临床应用PRP制备方法的比较研究硕士生姓名：指导教师：专业名称：摘要目的：用对兔脂肪干细胞(adipose．derivedstemcells，ADSCs)增殖的影响来验证Tubex和传统二次离心法制各自体富血小板血浆(platelet．richplasma，PRP)各自生物学效应

7、，来探讨一种安全、快速、高效制备PRP的方法。方法：1选用新西兰大白兔，雄性，取兔附睾部区脂肪垫，I型胶原酶消化法培养兔ADSCs，并观察细胞形态特征。2选取P4第4代ADSCs进行成脂、成骨诱导分化及染色来鉴定ADSCs。3PRP的制备采用兔心脏穿刺抽血，二次离心的方法，并行血小板计数及血小板回收率的计算。4将第4代细胞分为空白组(完全培养基180u1+单纯DMEM培养基20la1)；对照组(细胞180ul+单纯DMEM培养基20u1)、全血组(细胞180ul+全血血浆20u1)、Tubex制备的PRP组(细胞180ul+PRP20

8、u1)、传统二次离心法制备的PRP组(细胞180ul+PI冲20u1)。采用CCK．8法(Cell．CountingKit．8)检测不同作用时间(24h、48h、72h)各组对ADSCs增殖活动的影响。5将全血、Tube