关于梅毒血清学试验的几个问题

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1、关于梅毒血清学试验的几个问题郭红亮（湖北武警医院检验科4300061）【中图分类号】R446.ll【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2010）20-0012-02梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种（Treponemapallidumsubsp.pallidum）（也称为梅毒螺旋体）引起的一种性传播疾病。梅毒的诊断依赖病史、临床表现和实验室检查。实验室检查项目包括血清学检验、直接查梅毒螺旋体和梅毒螺旋体核酸测定。血清学检验是目前医院检验科常规开展的项目。在实际工作中，我们发现由于对梅毒血清学检验方法的熟悉稈度、实验室条件及实验方法的局限性等原因，相关人员存在着对梅毒血清学检

2、验认识不够深入甚至错误的现象，望能引起大家的重视。1非特异性与特异性梅毒螺旋体血清学试验人类对梅毒无先天免疫性。感染梅毒螺旋体后，人体能够产牛两类抗体,即非特异性抗体和特异性梅毒螺旋体抗体。首先产牛特异性IgM型抗梅毒螺旋体抗休，感染两周后即可测出。早期梅毒抗梅治疗3〜9个月后或晚期梅毒治疗两年后，大部分病人IgM可以转阴，再感染时乂出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现。感染梅毒螺旋体四周左右产牛特异性IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可继续存在,甚至终牛在血清中都可测出o机体产牛的非特异性抗体叫反应素（reagi

3、n）,是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。一般在感染后5〜7周（或下疳出现后2〜3周）产生，经正规治疗后可逐渐消失。梅毒血清学试验根据抗原不同分为两类，一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验，如快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等，该类试验所测物质为血清中的反应素，主要用于梅毒的筛查和疗效监测。另一类是特异性梅毒螺旋体抗原血清试验，使用的抗原为梅毒螺旋体的特异性成分。方法主要有荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）.梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体酶联免

4、疫吸附试验（TP-ELISA）.梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT,如金标记免疫层析法）、免疫印迹试验（Westernblot）等。目前临床实验室尤其是基层实验室最常用的方法有TRUST、RPR、ELISA和TPPA等。2两类方法的优缺点比较非梅毒螺旋体抗原血清试验优点：一、非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性的患者往往是梅毒现症感染者，临床上即可开展治疗。二、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随成功治疗而逐渐下降，故可以作为疗效观察的指标。早期梅毒患者在治疗后6个月内症状消失口非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度有至少4倍的下降。晚期梅毒或隐性梅毒患者在治疗后12-24个月内非梅毒螺旋体抗原血

5、清试验滴度有至少4倍的下降，表示抗梅毒治疗成功。三、此类方法价格低廉,操作简便。非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺点：一、特异性：由于在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及孕妇中均可出现反应素，所以此类试验有吋会出现假阳性反应。二、敏感性：约1%・2%的二期梅毒病人可以出现因为抗体过量引起的前带反应现象导致结果假阴性。此外，由于反应素出现的时间晚于特异性梅毒螺旋体抗体，晚期梅毒或经过治疗后反应素可能转阴，这类试验对隐性梅毒也不敏感，因此，用此类试验进行梅毒筛查时,存在相当数量的漏检⑴。特异性梅毒螺旋体抗原血清试验的优点是具有较高的敏感性和特异性,FTA

6、-ABS.TPPTA、ELISA等在国内被用作“确证试验”。缺点是成本较高，操作相对复杂，不能作为疗效观察指标，不能绝对排除假阳性。正是因为两类方法各有特点，不同实验室采用的方法也存在差异，用不同方法对同一份标本检测时，可能会得出不同的结果。所以，报告梅毒结果时应注明检测方法，以便不同实验室间进行比较。3梅毒螺旋体抗体试验生物学假阳性问题3.1梅毒血清学试验假阳性的生物学基础特异性梅毒螺旋体抗原血清试验所测为抗梅毒螺旋体的IgG/IgM类抗体。试验中所用抗原或为T.pallidumsubsppallidum的Nichols株冻干悬液(FTA-ABS),或为Nichols株超声处理

7、(或SDS提取)的材料仃PHA、TPPA),或为纯化的/基因重组的分子量(MW)47000>45500、17000>15500的T.pallidum特异抗原(ELISA、金标记免疫层析、免疫印迹)。按标准的原设计方法，进行这些试验时,待测血清都应预先用非致病性密螺旋体T.phagedenis的Reiter株提取物或超声处理材料进行吸收。吸收稀释液中还含有正常兔睾丸提取物、正常兔血清(Nichols株是在兔睾丸中繁殖的)。TPHA试验用的吸收稀释液中还含有超声处理的绵羊红细胞和牛红