以脂肪细胞分泌因子脂联素为靶点的具有减肥作用中药的初步筛选

《以脂肪细胞分泌因子脂联素为靶点的具有减肥作用中药的初步筛选》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河南中医学院２０１３届硕士研究生学位论文以脂肪细胞分泌因子脂联素为靶点的具有减肥作用中药的初步筛选研究生姓名：路玲玲导师：宰军华主任医师指导组成员：冯志海主任医师王幼平教授李强副主任药师崔琳主管药师燕树勋副教授学科、专业：中医内科学所属院、系：河南中医学院第一临床医学院中国﹒郑州２０１３年４月３０日硕士学位论文原创性声明本人所呈交的硕士学位论文，是在导师宰军华教授的指导下，独立进行科学研究工作所取得的成果。除文中已特别加以注明引用的内容外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献

2、的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。特此声明。论文作者（签名）：年月日硕士学位论文使用授权声明本人已完全了解河南中医学院有关保留、使用硕士学位论文的相关规定，同意学校保留或向国家有关部门、机构送交本学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权河南中医学院可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编本论文（注：保密论文在解密后适用本授权声明）。特此声明。论文作者（签名）：导师（签名）：年月日年月日目录目录摘要.

3、.........................................................-1-Abstract........................................................-3-前言..........................................................-5-材料与方法......................................................-7-结果.........

4、................................................-19-讨论.........................................................-25-结论.........................................................-29-致谢.........................................................-30-参考文献..................

5、.....................................-31-附录1图片...................................................-34-附录2综述...................................................-44-附录3在读期间论文论著和科研情况..............................-52-摘要摘要目的：肥胖症严重危害着人们的健康，与糖尿病(DM)、冠心病(CHD)、高血压(HBP)、脂代谢紊

6、乱及动脉粥样硬化(AS)等疾病的发生密切相关。脂肪组织的变化是肥胖症发生的根本原因，脂联素(adiponectin，ADI)是由脂肪组织分泌的一种特异性蛋白，在机体糖脂代谢中起着重要的调节作用，亦成为治疗肥胖的新靶点。本课题以3T3-L1细胞系为工具，利用分子生物学技术，从30味中药中筛选对人ADI基因启动子表达有影响的药物，进一步探明此类中药治疗肥胖的分子生物学机理，为临床应用提供药理学基础。方法：1．制备30种不同浓度中药水溶性提取物(ExtractsofChineseMedicalHerbs，ECMH)，常规体外培

7、养小鼠前体脂肪细胞3T3-L1，分别以浓度为（0.001、0.01、0.1、1、10）mg/ml的ECMH刺激3T3-L1前体脂肪细胞24h，通过细胞形态学和MTT法初步筛选出对细胞有影响但损伤较小的最高药物浓度进行下步实验；2．采用实时荧光定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR，RT-PCR)技术分别检测30种ECMH对小鼠3T3-L1前体脂肪细胞和成熟脂肪细胞分泌因子ADImRNA水平的影响，根据统计分析结果筛选数味药进行下步实验；3．利用PCR技术从人全血基因组DNA中分

8、别扩增出1.1kb和2.1kb长度的ADI基因启动子片段，经纯化酶切后克隆入载体荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic中，形成重组质粒ADIpromoter1.1-pGL3-Basic和ADIpromoter2.1-pGL3-Basic，以pcDNA3.1-EGFP为对照载体，在脂质体（lipofectamine2