硫化氢对蛛网膜下腔出血早期脑损伤的保护作用

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1、万方数据苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：刘拖搀El期：竺!生二生万方数据苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科

2、院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在——年一月解密后适用本规定。非涉密论文函论文作者签名：盘艳捡El期：丝竖二生导师签名万方数据硫化氢对蛛网膜下腔出血早期脑损伤的保护作用中文摘要研究目的：中文摘要建立大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoidhemorrhage，SAH)模型，通过检测脑组织中的GFAP、MMP．9、c．fos、casp

3、ase-3及Bel一2的表达变化，探讨外源性硫化氢供体硫氢化钠(sodiumhydrosulfide，NariS)对SAH早期脑损伤的保护作用及可能机制。方法：1．大鼠SAH模型的建立，参照AyerRE等的方法进行并加以改良。2．实验分组：假手术组：大鼠10只，线栓进入颈内动脉后不刺破分叉处，腹腔注射0．5mL生理盐水，24h神经学评分观察。SAH组：大鼠10只，如模型建立方法，腹腔注射0．5mL生理盐水，24h神经学评分观察。H2S组：大鼠48只，建立SAH后，腹腔注入NariS，浓度分别为01amol／kg、6．251xmol／kg、12．5m'nol／kg、25tamol／kg

4、、501xmol／kg，根据浓度和大鼠重量计算NariS的量，溶于0．5mL生理盐水中。其中NaHS501xrnol／kg组大鼠按12h、24h、48h各6只大鼠，多聚甲醛灌注、取脑、冰冻切片，备用：NariS各浓度组6只大鼠用于Western-blot检测。3．用免疫荧光和Western．blot检测海马皮质和额顶叶皮质GFAP、MMP．9、c．fos、Bcl．2和caspase．3表达的影响。4．统计学分析：各组数据采用SPSS13．0软件包进行统计分析，各组之间的比较采用单因素方差分析，0．05为差异有统计学意义。Westernblot结果应用Imagej和GraphPadPr

5、ism5软件进行分析，其值用灰度比值表示。结果：万方数据中文摘要硫化氢对蛛网膜下腔出血早期脑损伤的保护作用1．硫化氢对SAH早期脑损伤的保护作用：模型建立后，用神经评分法进行评分，结果表明，H2S有明显改善脑功能的作用，死亡率从50％降到10％。2．硫化氢对GFAP表达的影响：我们用免疫荧光和Westem．blot检测了海马和额顶叶皮质GFAP的表达，结果表明，假手术组星形胶质细胞的GFAP呈低表达，SAH模型组表达明显增多(P

6、果显示，SAH模型组与假手术组相比MMP．9和c．fos蛋白表达明显增加(尸<0．01)，而硫化氢组表达明显减少(尸<0．05)。4．硫化氢对凋亡因子Bcl．2和caspase．3表达的影响：免疫荧光和Western．blot检测结果显示，海马皮质Bcl．2的阳性细胞主要分布在C2和C3区，假手术组和SAH组都呈阳性表达，但硫化氢组Bcl．2阳性细胞明显增加(P

7、质GFAP表达增多。H2S干预SAH后，GFAP表达有明显下调，H2S对脑损伤的保护作用可能与改善胶质细胞功能有关。2、SAH后海马皮质和额顶叶皮质的MMP．9、c．fos因子表达增多。H2S处理后明显降低两个因子的表达，这表明H2s对神经元的损伤有保护作用。3、SAH后H2S有明显改善凋亡因子caspase一3、Bcl一2的表达，表明H2S对脑损伤的保护作用可能与凋亡机制有关。关键词：蛛网膜下腔出血；H2s：脑损伤；GFAP；MMP．9；c．fos；ca