新型dna-ag簇的合成、荧光性能与应用

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1、分类号：Q鱼三2：2UDC：墨箜编号：—1029921—112018@ji；!工薛大学MASTER，SDISSERTATIoN新型DNA．Ag簇的合成、荧光性能与应用THESYNTHESIS，FLOURESCENCEPROPERTITYANDAPPLICATIoNoFTHENEWTYPESOFDNA—AGCLUSTERS指导教师隆挞云申请学位级别亟±学科(专业)丝堂工猩论文提交日期2Q!垒生鱼旦窆目论文答辩日期2Q!垒生鱼月学位授予单位和日期江菱太堂2Q!垒生旦目2014年6月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己注明引用的

2、内容以外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：趣奄恁汐I争年占月他日学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据

3、库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生处办理。本学位论文属于不保密d／学位论文作者签名：愁诱这指导教师签名：甲专引≥。J}年6月闷日纱，“年多月，c，日江苏大学硕士学位论文摘要癌症成为严重威胁人们身体健康和生活质量的恶性疾病之一，早发现早治疗将大大提高癌症治愈的机会。癌症是免疫系统不识别的异物，通常在器官的中心开始生长。生物标志物是一种位于细胞内、细胞间或细胞表面，具有重要生物学功能的分子，对不同的病理条件表现出特异性表达或活性变化。早期癌细胞中生物标志物的浓度较

4、低，不易探测。因此，发明一种能探测低浓度生物标志物的材料，实现人体组织中癌细胞的早期诊断和治疗成为研究的热点。本文综述了荧光纳米材料DNA-Ag纳米簇(DNA—AgNCs)的研究进展及应用，设计了三种具有不同荧光性能的DNA．Ag，并将其成功地应用于肝癌细胞(HepG．2)的探测、不同抗癌毒性氟硼吡咯衍生物同分异构体的区分及温度控制的靶向性荧光药物传输系统的构建。主要的内容和结果从三个方面来论述：1)用识别序列为5’一CTACGTGCT．3’的双功能DNA作为模板，构建了一种新型的荧光银纳米簇。发现识别序列的互补序列(目标序列)可以猝灭荧光银纳米簇的荧光强度，并使银纳米簇的颗粒变得更小更

5、均匀；牛血清蛋白(BSA)能诱导此种银簇重新组装成较大的颗粒，并增强了荧光发射强度；以上结果表明此种DNA—AgNCs的识别序列具有特异性荧光敏感。进而，该荧光探针对正常细胞(WRL．68)全蛋白、HepG．2细胞全蛋白和5．氟尿嘧啶(5．Fu)处理过的HepG一2细胞全蛋白有不同荧光响应。结果显示：HIF高表达的HepG一2的细胞全蛋白明显地减弱了荧光发射强度。因此，此种DNA—AgNCs可以作1为探测HIF高表达的癌细胞的荧光探针。2)制备了一种新型同源双链结构的DNA．AgNCs。通过比较荧光猝灭常数来区别细胞毒性不同的对位．氟硼吡咯(BODIPY)衍生物(C2)并[1lN位．BO

6、DIPY衍生物(C1)。发现C2的插入DNA双链的作用方式和与DNA．Ag形成的共轭体系导致的高效能量转移是实现区别BODIPY同分异构体的两个主要因素，后者也是C2荧光增强的原因。此外，这种DNA—AgNCs对HepG一2细胞全蛋白有更高的灵敏度，有望成为探测缺氧诱导因子高表达的癌细胞的传感器。3)以特定的发夹结构DNA序列为模板，合成了一种在发夹结构的茎和环上生长银的高稳定性、荧光发射在610nm的DNA—Ag簇。发现在DNA—Ag合成前后，DNA由原来的含有C．四聚体的i-motif结构变为反相平行．四链结构，并且当温度升到76oC后，DNA．Ag由原来的纳米球(10～50nm)，

7、重新组装成纳米立方体。更有趣的是，DNA．Ag不仅在25-66。C范围内对温度变化有着可逆的荧光感应，而且还可以作为是一种大容量的载药工具，它的载药效率是正常双链DNA的2倍。而且，升高温度引起的茎双链解链促使Dox的释放，使它成为一种温度可控释放的药物载体。此外，由于模板DNA茎双链的特殊序列，合成的DNA—Ag对HIF高表达的肝癌细胞(HepG．2)有荧光感应。关键词：DNA—Ag，缺氧诱导因子，氟硼吡咯衍生物，温度敏感性荧光，