非综合征型唇腭裂易感基因tgfβ3、irf6、msx1在胚胎时期的表达研究

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1、万方数据分类号：R782.21密级：学号：2011109106单位代码：10759石河子大学硕士学位论文非综合征型唇腭裂易感基因TGFβ3、IRF6、MSX1在胚胎时期的表达研究学位申请人闫佳谢金敏指导教师洪玉申请学位门类级别医学硕士学科、专业名称外科学研究方向肝胆外科所在学院医学院中国·新疆·石河子2014年5月万方数据StudyontheexpressionofNon-syndromiccleftlipandpalatesusceptibilitygeneTGFβ3、IRF6、MSX1inembryonicADissertation

2、SubmittedtoShiheziUniversityInpartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByYanJia(InternalMedicine)DissertationSupervisor:XieJinMinHongYuMay,2013万方数据万方数据摘要目的：观察非综合征型唇腭裂易感基因TGFβ3、IRF6、MSX1在小鼠胚胎唇和腭形成时期的表达情况，探索其在腭裂畸形中的作用机制，为后续实验及临床实验提供实验依据。方法：1.建立维甲酸诱导

3、小鼠腭裂模型，在C57BL/6N孕鼠第10个妊娠日(Gestationday,GD),实验组按照100mg/kg体重对孕鼠进行维甲酸一次性灌胃，对照组给予等体积植物油。分别于GD12天、GD13天、GD14天、GD15天，脱颈处死孕鼠，剖宫取胚鼠。2.采用实时荧光定量PCR（quantitativereal-timepolymerasechainreaction,QRT-PCR）技术和免疫组化的技术方法检测TGFβ3、IRF6、MSX1基因在胚胎GD12天、GD13天、GD14天、GD15天mRNA和蛋白的表达和分布情况。结果：1.mR

4、NA表达：TGFβ3mRNA的表达量，实验组中各组与GD12天相比，其他各组均升高差异有统计学意义（p<0.05），对照组中各组与GD12天相比，其他各组均升高差异有统计学意义（p<0.05）；实验组与对照组相比，实验组均高于对照组，其中GD14天差异有统计学意义（p<0.05）。IRF6mRNA的表达量，实验组中各组与GD12天相比，其他各组均升高差异有统计学意义（p<0.05），对照组中各组与GD12天相比，其他各组均升高差异有统计学意义（p<0.05）；实验组与对照组相比，除GD15天实验组高于对照组外，其他各组均低于对照组，其中

5、GD14天差异有统计学意义（p<0.05）。MSX1mRNA的表达量，实验组中各组与GD12天相比，其他各组均升高差异有统计学意义（p<0.05），对照组中各组与GD12天相比，除GD13天降低，其他各组均升高，差异均无统计学意义；实验组与对照组相比，除GD15天外，实验组均高于对照组，其中GD13天、GD14天差异有统计学意义(p<0.05)。2.蛋白表达：TGFβ3蛋白表达，实验组中各组与GD12天相比，其他各组均升高差异有统计学意义（p<0.05），对照组中各组与GD12天相比，其他各组均升高差异有统计学意义（p<0.05）；实验

6、组与对照组相比，实验组均高于对照组，除GD13天外其他各组均差异有统计学意义(p<0.05)。IRF6蛋白表达：实验组中各组与GD12天相比，其他各组均升高，除GD14天其他各组差异有统计学意义（p<0.05），对照组中各组与GD12天相比，其他各组均升高，除GD15天其他各组差异有统计学意义（p<0.05）。实验组与对照组相比，除GD15天实验组高于对照组外，其他各组均低于相应对照组差异有统计学意义（p<0.05）。MSX1蛋白表达，实验组中各组与GD12天相比，其他各组均升高，除GD15天其他各组差异有统计学意义（p<0.05），对

7、照组中各组与GD12天相比，除GD14天升高差异无统计学意义，其他两组均降低差异有统计学意义（p<0.05）；实验组与对照组相比，实验组均高于对照组，除GD12天其他个组差异有统计学意义（p<0.05）。结论：1.TGFβ3基因mRNA和蛋白表达水平的上调，可能与胚胎时期唇和腭的形成有关。2.IRF6基因mRNA和蛋白在GD12～GD14天的低表达水平，异常调控腭突的生长发育，而导致唇腭裂的发生。3.MSX1基因mRNA和蛋白的高表达水平，异常调控了腭突的生长发育，导致腭裂的发生。关键词：腭裂，维甲酸，TGFβ3，IRF6，MSX1I万

8、方数据AbstractObjective:1.Useofretinoicacidinduced10-daygestationofpregnantratsformedfetuseswithcongenital