嗜盐微生物的分离、分类及应用研究

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1、摘要对采自渤海沿岸盐场和青海盐湖的80份样品进行了不同类群的嗜盐、耐盐微生物的分离，得到了73个菌株，其中包括20株细菌，5l株放线菌及2株真菌。本实验对这些分离菌株进行了耐盐、耐碱测定；进行了形态、细胞化学分析：采用16SrDNA全序列分析等分类方法对其中一些中度嗜盐放线菌进行了系统发育研究：此外，本实验还对供试菌株的生理活性物质和降盐效果进行了研究。／√研究发现，分离菌株多为中度嗜盐菌，生长最适NaCI浓度为5-lo％，有／＼的甚至可在饱和盐溶液中生长。其中的中度嗜盐放线菌多数耐碱性强，在pH值n．0的条件下生长良好。放线菌Dl叭l和G2叭

2、3是嗜盐嗜碱放线菌，盐度低于2％，pH值低于8．0即不生长。对分离的放线菌和真菌进行了形态的电镜观察，除链霉菌属外，大多数菌株无法根据形态判定其种属，说明仅依靠形态特征进行分类是不准确的。测定了部分嗜盐放线菌的细胞壁氨基酸组分，发现本次实验分离的放线菌株多数含有meso．DAP，为稀有放线菌。对5株菌(编号分别为D1013、D3115、D3116、D3414、D3615)进行了16SrDNA序列分析，结果表明D1013、D3ll5、D3414均属于拟诺卡氏菌属(Norcardiopsis)，D1013是与Ⅳantarctica关系最近的分类单元

3、。D3115和D3414是与Ⅳdassonvillei关系最近的分类单元。D3116属于链霉菌属(Streptomyces)，是与Sgr括eussubsp．griseus关系最近的分类单元。16SrDNA基因近乎全序列分析结果表明菌株D36l5可能属于二拟诺卡氏菌属，根据16SrDNA基因全序列分析构建了拟诺卡氏菌属的系统发育进化树，由系统发育树可以看出，菌株D3615属于拟诺卡氏菌属，且形成独立的分支，与拟诺卡氏菌属已描述的菌种的模式菌株的16SrDNA序列之间的差异数在20～6Int之问，差异较为明显。生理生化特性试验也发现其与拟诺卡氏菌属

4、的其他菌株有一定差异。因此菌株D3615可能为拟诺卡氏菌属的一个新的分类单元。————————————-—__●-__-____-__-__—__-________--_-____--___●●--————————————一一——j；捕要本实验还对分离所得嗜盐菌进行了应用研究。对两株放线菌所产生的生理活性物质进行了抗菌谱测定，发现两者均对革兰氏阳性细菌有很好的抑制作用，也可抑制部分真菌的生长，抗菌谱较广。最后对嗜盐微生物的降盐效果进行了研究，发现几乎所有嗜盐菌对培养液中NaCI含量减少都有一定的作用，降盐与耐盐性之间有一定的相关性，但不明显，降

5、盐性与菌株特性也有密切关系。一些菌株的降盐率在20％以上，如果通过驯化、基因转移等技术处理，将可能吖高效用于高盐污水处理乃至海水淡化。J／，上关键词：嗜盐微生物；分离；系统发育；拟诺卡氏菌属；降盐，今受—————————————-_—_—_●__--_-●-_--__-—_--—_______-I__--________●_--—‘’——一一——tliAbstraetAbstractSeventy—threehalophilicandhalotolerantstrainswereisolatedfromeightysamplesinsaltpo

6、olatBohaiseacoastandinsaltlakesofQinghai，whichincludedtwentybacteria，fifty—oneactinomycetesandtwofungi，Inthisstudy,thehalotoleranceandalkalitoleranceranges，morphological，chemicalanalysisofthesenewisolatesweredetermined；Phylogeneticanalysiswascarriedoutonsomemoderatelyhalophi

7、licactinomycetesmainlydependedonthe16SrDNA／RNAsequencing；Inaddition，thebioactivemicrobiolproductsanddesalteffectweretestedonthesenewisolates．Mostofthenewisolatesweremoderatelyhalophilies．Theygrewbestin5-10％NaCIcondition，someevencouldgrowinsaturatesolutions．Mostofthenewisolat

8、edmoderatelyhalophilicactinomycetescouldtearhighalkalitconditionandcouldgro