表皮生长因子egf对胰腺祖细胞增殖的调控

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1、万方数据学校代码：10225学号：S14566学位论文表皮生长因子EGF对胰腺祖细胞增殖的调控指导教师姓名：申请学位级别：论文提交日期：授予学位单位：滕春波硕士2014．4梁杰东北林业大学学科专业：发育生物学论文答辩日期：授予学位日期：答辩委员会主席：论文评阅人：未必栉素大学万方数据U11ivers时Code：10225RegiSterCode：S14566DissertationfortheDegreeofMasterTheE航ctofEpidemalGtheProliferationofthePancreaticPro

2、genitorCellsCandidate：SupeI·visor：AssociateSupervisor：AcademicDeg他eAppliedfor：Speciali锣：DateofOralExamination：Li2ulgJiePro￡TengChuIl-BoMasterDevelopmentalBiologyUniVersi够：NortheastForest叫UniVersity万方数据摘要糖尿病是一类常见的代谢疾病，由于胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗所引起，主要包括l型和2型糖尿病。其中2型糖尿病是由于胰腺D细胞

3、自身免疫损伤造成胰岛素分泌不足，所以患者需要注射外源胰岛素。胰岛移植是根本治疗糖尿病的方法，但是供体的不足限制了该方法的推广。因此，利用干细胞治疗糖尿病被寄予厚望。本实验室通过胰腺部分消化结合连续转孔方法分离获得了呈集落样生长的胰腺细胞，并证实所分离获得的细胞具有胰腺祖细胞的特性。在此基础上，本实验迸一步研究表皮细胞生长因子EGF对胰腺祖细胞增殖的调控，从而为利用胰腺祖细胞治疗糖尿病打下基础。CCK-8检测表明表皮细胞生长因子EGF能够促进胰腺祖细胞的增殖，而且这种增殖不依赖于血清和细胞粘附。West咖-blot检测发现经

4、EGF诱导后，细胞的Akt、ERK磷酸化水平明显提高，即P13K．Ah和MEK．ERK信号通路均被EGF激活；进一步使用信号通路抑制剂U0126和LY294002以及干涉RNA，则发现P13K．Akt信号通路在EGF诱导的祖细胞增殖中占主要角色。因此，本实验证明表皮细胞生长因子EGF能够通过P13K．Akt信号通路促进胰腺祖细胞的增殖，从而可能实现体外大量扩增获得胰腺祖细胞，更为利用成体胰腺祖细胞体外分化，移植治疗糖尿病提供了基础。关键词EG限；胰腺祖细胞；P13K-Ah；MEK．ERK万方数据AbstractDiabet

5、esmellitusisagroupofmetabolicdiseaSes，whlchlsam剐orworldwldehealthproblem．TransplaIl_tationofisletsofL锄gerhaIlshaSbeenshowntobee虢ctiVeforcuringdiabetes，butitsusageis1imitedbylackofdonorislets．Therefore，presentresearchesarefocusedonacquisitionofsu伍cientp-cellsforcen

6、r印lacememther印yofdiabetes．Epidemalgrowmfactor(EGF)isagro砒factorthatplaysanimport觚troleincenprolif．eration，ashasbeendemons嘣edbymHnerousstudies．However，nlereissof打noreportaboutalee岱：ctofEGFonthepmliferationof也epancreaticprogenitorcells加Vf舶D．Int11isstudy，apopIllation

7、ofpotentidprogeIlitorcellsfbmadultmousepancreaSisisolatedande耐chedbyusingap耐ialdigeStionaJldcontinuoustransf．erring-Wellmetllod．ToexploremeroleofEGFontllisceUpo”lation，wefirstcon丘mviaImPCRthatitsrec印tor(EGFR)islliglllyexpressedinthecells．Then，CCK-8anmysesreVealtha

8、tEGFcanpromotetheproliferationofthepaI]lCI。eaticprogeI】itorcells．Wrestem-blotresultsdemons眦ematthephospho巧l撕onleVelsofAI(taIldERKaresigIlificaIl_Uyincre