松萎蔫病病原的研究 毕业论文样式

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1、小五号宋体×××××专业毕业论文小二号黑体，居中排列松萎蔫病病原的研究四号宋体，1.5倍行距学生姓名：专业班级：座号：指导教师：完稿日期：松萎蔫病病原的研究小二号黑体，居中四号宋体，1.5倍行距写作提纲一、绪论自从20世纪初松萎蔫病被发现以来，该病已经从北美洲扩散到日本，后来又传入中国、韩国等亚洲国家和欧洲的葡萄牙。该病的致病机理尚未研究清楚，松材线虫却长期以来被认为是PWN的唯一病原。然而，有研究报道松材线虫相关的细菌能产生毒素。有实验表明，无菌的松材线虫虽然能侵入松树木质部，但在不携带细菌的情况下对松树没有致病力。这些林间试验的数据说明只有当松材线虫又感染细菌情

2、况下，才能使被接种的黑松患病死亡，但这些试验结果并不能有力地证明复合侵染假说，虽然试验结果中仍有试树死亡，其死亡的原因可能是接种后无菌线虫从接种处或因机械或昆虫取食、产卵造成的伤口处获得了细菌。用实验证明此假说的主要困难是创造一个在实验室或野外接种成年松树的无菌环境条件，且幼苗较成年松树(3年或以上)的生理和病理有很大差别，因此应选用成年的松树进行接种试验。笔者从研究松材线虫的行为与环境关系的预实验中发现，松材线虫的运动与环境温度有密切关系。在7℃的环境中，松材线虫就完全失去了运动能力。同时，据研究报道健康黑松体内没有细菌，据此设计了一种称之为“冷闸”的接种试验装置

3、，使用该装置将松材线虫与其携带的细菌隔离在灭菌的接种枝内，对大树接种时，可以不用对整株树灭菌，仅对接种枝灭菌就能保证试验的进行，以此来确定松萎蔫病的病因。二、本论（一）材料与方法1、供试染菌和无菌松材线虫的获得2、黑松愈伤组织的诱导和继代培养3、松材线虫携带细菌菌株的获得与鉴定4、接种无菌线虫、细菌的再分离及鉴定（二）结果与分析1、不同接种处理后松树的病状2、不同接种处理后的再分离、鉴定结果三、讨论实验结果进一步验证了松材线虫携带的致病细菌能产生毒素，并且是这些毒素导致了松树的萎蔫和死亡。笔者的这些实验结果证明松材线虫与其携带的互惠共生致病细菌复合体诱导了松萎蔫病。

4、因此，松萎蔫病是用实验验证的首例由线虫一细菌共生复合体诱导的植物病害。起首空二格，四号楷体加粗小二号黑体，居中排列松萎蔫病病原的研究小四号宋体，居中排列赵博光小四号楷体，1.5倍行距，词间空一格起首空二格，四号楷体加粗小四号楷体，1.5倍行距【内容摘要】为了探讨松萎蔫病与松材线虫的关系，笔者研制了一种简单试验装置“冷闸”，使接种的线虫被隔离在松树接种枝内而不能迁移。用该装置进行接种试验的结果表明:在松材线虫被局限于接种枝内而不能移动到寄生其他部位的情况下，接种无菌松材线虫与致病荧光假单胞菌,以及该致病细菌体外培养的无细胞滤液，同样能诱发该病。该致病细菌又从接种无菌线

5、虫和致病细菌后病死寄主中分离到并被鉴定，证明符合柯赫法则。致病荧光假单胞菌体外培养的无细胞滤液接种试验结果说明，该致病菌株培养物中的内吸性毒紊导致了寄主的萎蔫和死亡。由此，松萎蔫病经实验证实为首例由细菌和线虫互惠共生复合体引起的植物病害。【关键词】松萎蔫病松材线虫线虫-细菌复合体荧光假单胞细菌小四号宋体，1.5倍行距自从20世纪初松萎蔫病(PineWiltDisease，简称PWN)被发现以来，该病已经从北美洲扩散到日本，后来又传入中国、韩国等亚洲国家和欧洲的葡萄牙。该病的致病机理尚未研究清楚，松材线虫却长期以来被认为是PWN的唯一病原。然而，有研究报道松材线虫相关

6、的细菌能产生毒素。有实验表明，无菌的松材线虫虽然能侵入松树木质部，但在不携带细菌的情况下对松树没有致病力。这些林间试验的数据说明只有当松材线虫又感染细菌情况下，才能使被接种的黑松患病死亡，但这些试验结果并不能有力地证明复合侵染假说，虽然试验结果中仍有试树死亡，其死亡的原因可能是接种后无菌线虫从接种处或因机械或昆虫取食、产卵造成的伤口处获得了细菌。用实验证明此假说的主要困难是创造一个在实验室或野外接种成年松树的无菌环境条件，且幼苗较成年松树(3年或以上)的生理和病理有很大差别，因此应选用成年的松树进行接种试验。笔者从研究松材线虫的行为与环境关系的预实验中发现，松材线虫

7、的运动与环境温度有密切关系。在7℃的环境中，松材线虫就完全失去了运动能力。同时，据研究报道健康黑松体内没有细菌，据此设计了一种称之为“冷闸”的接种试验装置，使用该装置将松材线虫与其携带的细菌隔离在灭菌的接种枝内，对大树接种时，可以不用对整株树灭菌，仅对接种枝灭菌就能保证试验的进行，以此来确定松萎蔫病的病因。一级标题，四号黑体加粗，左对齐，独占行，末尾不加标点1材料与方法二级标题，小四号黑体加粗，左对齐，独占行，末尾不加标点1.1供试染菌和无菌松材线虫的获得从采集于野外自然感病枯死的黑松木段上取样，分离方法参见文献。将分离并鉴定的染菌线虫培养在长满灰葡萄孢的PDA