一氧化氮促进肺癌侵袭转移的初步研究

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1、万方数据中图分类号Q2墨UDC570硕士学位论文学校代码!Q5三三密级公珏一氧化氮促进肺癌侵袭转移的初步研究Apreliminarystudyofthenitricoxideinpromotinglungcancerinvasionandmetastasis作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：戴骐生物学细胞生物学生命科学学院刘艳平教授论文答辩日期丝!竺：童兰7．答辩委员会主中南大学2014年5月万方数据学位论文原创性声明卿本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究

2、成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：盔笺塑日期：兰!!年_鱼月』日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以

3、将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：莹丝Et期：鲨!生年』月三Et导师签名二趱日期：丝!竺年』月旦Et万方数据摘要：一氧化氮促进肺癌侵袭转移的初步研究目的：本研究的目的是要阐明iNOS、细胞骨架蛋白CaD、OPN在肺癌组织中的表达和临床数据，并对发生了肺癌转移的临床患者数据间的相互关系进行初步探讨。方法：(1)流式细胞术检测转染iNOS和使用SIN．1后A549细胞内钙离子浓度变化。(2)Westernblott

4、ing检测转染iNOS和使用SIN-1后Caldesmon在A549细胞中表达变化。(3)免疫荧光检测转染iNOS和使用SIN．1后A549中Caldesmon分布和数量变化。(4)划痕实验检测转染iNOS和使用SIN一1后对A549运动迁移能力影响。(5)免疫组织化学检测iNOS、Caldesmon、OPN在肺癌组织和颅内转移瘤中的表达及分布。(6)流式细胞术检测发生和未发生骨转移非小细胞肺癌患者血清中EPCAM+／OPN+细胞比率。(7)ELISA检测发生和未发生骨转移非小细胞肺癌患者血清中OPN浓度。结果：(

5、1)流式结果显示转染iNOS和使用SIN．1后A549细胞内钙离子浓度明显增高。(2)Westernblotting结果示转染iNOS和使用SIN一1后，Caldesmon的表达都有明显上调，其中使用SIN．1后A549中Caldesmon的表达略高于转染iNOS。(3)免疫荧光结果显示转染iNOS和使用SIN．1后，原本散在分布在胞浆的Caldesmon变成在细胞骨架膨大部的高度聚合，并呈现F．actin．enriched结构，加入抑制剂1400w后聚合有减弱分散趋势。(4)划痕实验结果显示转染iNOSII万方数

6、据和使用SIN．1后，相同时间内A549细胞划痕愈合速度快于对照组。(5)免疫组化结果显示，iNOS、Caldesmon、OPN在肺癌组织和颅内转移瘤中高表达，其中OPN在肿瘤细胞中表达，iNOS主要在靠近肿瘤组织的基质细胞中表达，Caldesmon则在肿瘤组织、脉管组织及基质中表达。(6)流式结果显示发生骨转移肺癌患者血清中EPCAM+／OPN+细胞比率高于未发生骨转移肺癌患者。(7)ELISA结果显示发生骨转移肺癌患者血清中OPN浓度高于未发生骨转移肺癌患者。结论：iNOS、Caldesmon以及OPN的超表达

7、与非小细胞肺癌的远处转移有密切关联，可作为转移肺癌的生物标志物。图8幅，表4个，参考文献102篇关键词：NO；iNOS；Caldesmon；0PN；肿瘤侵袭转移；肺癌分类号：570III万方数据ApreliminarystudyofthenitricoxideinpromotinglungcancerinvasionandmetastasisAbstract：Objective：Theaimofthisstudyistoelucidatetherelationshipbetweentheexpressionsofi

8、NOS，cytoskeletonproteincaldesmon，OPN，andclinicalparametersespeciallythemetastasisoflungcancer．Methods：(1)ThechangeoftheconcentrationofintracellularcalciumincellA549after仃eatedwithS