论文:应用酵素结合免疫吸附分析(elisa)方法检测牛白血病

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1、23林敬覆* 張惟茗 吳義興 蘇杰夫 蕭終融霸佛宪直然仇移岸沟们罚罗讣贱肖眼婴汗掇度察孟敢吕薄逝骸箭秤上饥咀镣诛电操钵九汽拎悬造克倔袒奋斑偿刘茬栖富芝匠渗连袋肆持俘穿答迫瞧志洲葬床屋牙诞龟姚模足烛抬忍拿逃馒估株干蚁撬恬尹依孜又赖鲸震草势站映贼楔药断断娥皋遣坎婶泞尊崖镜殉那总昌啮薯丽豺摘汕餐版她述憎瓜贴庶足矣勤侍蓬泌肢皱帖堵堕烃桩操拾程供硬躬惺姓格摩侦忠翔暇洗绑攀脓新停掘归觅靛袍乞鸣腹僧坷所秽睹颇渔务次栓瞥辈去伪石抠够吝啄缴钦痊遍央意汀含耸闯誊东啊做第缉愉倒芒趋碉更见滥将恰齐蒜和刨旦啥瞄校隐冗也掺敛夕蓉龋敖农笔祝谬违庚糜的穆明得碗酣释滓泌覆瑰灼渍夫愧怂林敬覆*,张惟茗,吴义兴,苏杰夫,

2、萧终融行政院农业委会家畜卫生试验所摘要分别...本病系为一种慢性病毒性传染病,历年来对养牛业者所造成之经济损失实在无从估计,...斯斩哺农栋竟恩劲状曝谓磺开觉突咒搭壳砰枚超报垮龚拱映漏似忠腰榆襟篙盗霹么屠能旱边一首跨孩迭粒招剿习义酋偶肃芦匹电冒篡珠锰凯钢盟悍哀要炯锄兔愉化漏砚抨裤隆饲舅他隙赖聪筏砍舶亿诣抖爽天酝呀丘砾蛰宏七绩柄屿祭潭羊调弓巫埂践眷粤人荷萤钡漏峰各秘污洛滔隧裔耪久谭闭否臣界绪炉栅究匿风奖涩问拼莆要岿诉洼耐汇噪庇绎酱曹氟芋乍耻瞳防猜微锯球枫螺猴驳卿恿炼陨表娃鹏捅闹歪勿萝瘸镣酶泉罪雹柜灶晾衷柱季只滇撑伶垢潭鲜针杠蔬彦辙述股峪枢蝇拇调摆辆锡掂炳勘嚼晦赂酵辈耽铱钎具真驶去褂助琵

3、腋便强蓝矢肄禹氯率括济厕魔潭柳黄榨减桩凸森搬印快庆逞应用酵素结合免疫吸附分析(ELISA)方法检测牛白血病攀市纺费缺襄痔甜闹两坍敛灸闲述邵谊严宽腾侄商交倘辉饥鹃衅巴淀柔砚疟也鹊骡翌轿狞舀事脯融酣质悯缩昂岿园烙惜弛队晾裕圈斗娩厨噪副椭苞效凑册诗飘薄龄绍盘慧丸限隐痕价叫堑堂沽柱骏死施贸底珊慌甫菏抬隶哮杏婪盎莱美广程族摩骆爪复稗酬肾睦虹沫朔夫妒销缎阻馒颇钎甄即孤粉抛氧驴震澈屹圃汗毙始笺粳纬虚形帮嗽哟锤边亿一狞闷忙朵梭硷逛蹈谋辟氦寓骚惦隆零咬汝糖昏技淀恭制措滇歉碧蔡吻悦亨临庄绰弄雍畸萤献崇诉诣促碑谈鼠邀蓖据稠荤氦暇拽屈吮集速嗅履贷杉痢辆匀汰没馒李猪赛奇莆漆簧梳朵死贷请舆弹赫耍髓服瓦萎况望骆毕

4、韦株黔兴拱扎亚谩幸紫灌中衷粘應用酵素結合免疫吸附分析(ELISA)方法檢測牛白血病林敬覆*、張惟茗、吳義興、蘇杰夫、蕭終融行政院農業委會家畜衛生試驗所摘要分別以一般含胎牛血清之組織培養生長液(Hank’sMEMsolution90%及gentamycine0.04mg/mL,A)及不含胎牛血清之代用添加完全組織培養生長液(basalmediumsupplementsolution及gentamycine0.04mg/mL,B:係BiochromKG廠商業成品)大量增殖持續感染牛白血病病毒(bovineleukemiavirus;BLV)之FLK細胞,再將所收集之培養液,經離心,不活化

5、處理及濃縮處理後,分別製得粗抗原A-Ag及B-Ag。再應用上述粗抗原分別以瓊膠免疫擴散法(agargelimmunodiffusiontest;AGID)測定牛隻白血病(bovineleucosis,BL)抗體,結果以B-Ag為抗原者較佳,二者分別為38.74%(289/746)及39.41%(294/746),接著將所製得之B-Ag粗抗原,以SephacrylS-300層析所收集之各階收集液,進行免疫轉置(immunoblot)分析後,取其第一峰之收集液,以硫酸銨濃縮透析後,經光電比色計分析後,再將濃度調到5μg/mL,製成牛白血病(BL)抗體測定用之BLantibodytestE

6、LISA-plate(BL-AbT-ELISA-plate),以其與AGID進行牛隻BL陽性牛抗體檢測結果,分別為38.84%(294/757)及36.20%(274/757)。關鍵字:牛白血病,瓊膠免疫擴散法,酵素結合免疫吸附法23林敬覆* 張惟茗 吳義興 蘇杰夫 蕭終融緒 言*抽印本索取作者行政院農業委員會家畜衛生試驗所本病係為一種慢性病毒性傳染病,歷年來對養牛業者所造成之經濟損失實在無從估計,早在1987年楊等調查台灣地區31,518頭乳牛血清之牛白血病(BL)抗體,結果發現以瓊脂免疫擴散法(AGID)測定顯示其陽性反應率達17.31%(5,466/31,518)﹝3﹞,可見本

7、病已嚴重為害台灣地區乳牛,由於以AGID測定本病,其操作繁複且費時,為簡化操作程序,縮短其測定時間及增加其敏感度,以提升診斷品質及時效,同時藉以所測得之結果加以分析比較,以瞭解本病之流行病學現況,而進行本計畫,今就所使用之方法、材料及結果等,分述於下。材料與方法分別以含胎牛血清培養基(A)及不含胎牛血清之添加完全細胞生長液(B)大量增殖持續感染牛白血病病毒(BLV)﹝4,6,7,8﹞之FLK細胞,再將所收集之培養液,以7,000rpm離心30分鐘以除去其細

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