wntβ-catenin、wnt10b在骨痂中的表达变化和2型糖尿病骨折愈合障碍的关系

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1、中图分类号逝墨31垒2UDC610硕士学位论文学校代码10533Wntp-eatenin、WntlOb在骨痂中的表达变化和2型糖尿病骨折愈合障碍的关系StudyontherelationshipbetweenthechangeofexpressionofWntl3·catenin，Wnt10bincallusandtype2diabetesfracturehealingdisorder作者姓名：石磊学科专业：临床医学研究方向；外科学学院(系、所)：湘雅三医院指导教师：刘振东副教授论文答辩日期：三!!!：。生：2∥答辩

2、委员会主席中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：Z磊日期：二丕业年上月卫日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被

3、查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：√噍导师签名础日期：2塑年兰月立日Wntp-catenin、WntlOb在骨痂中的表达变化和2型糖尿病骨折愈合障碍的关系摘要：目的：建立2型糖尿病大鼠动物骨折牵引模型，探讨骨痂中Wntl3．catenin、Wntlob的表达变化与2型糖尿病骨折愈合障碍的关系。方法：将30只6周龄健康雄性SD大鼠，按随机数字表

4、法分为对照组和实验组各15只，实验组喂以改良后的高糖高脂饲料，对照组喂以普通大鼠饲料。喂养8周后，实验组一次性腹腔注射小剂量STZ(30mg／kg)，对照组腹腔注射等量枸橼酸盐缓冲液。以同上方法喂养2周后，选取空腹血糖高于16．7mmol／L者选入实验组继续实验，2组大鼠一同建立左侧胫骨骨折牵引成骨模型，术后第二天开始延长胫骨，持续至术后第十四天，以0．15mm／次，2次／天的方法持续延长胫骨，术后第15天停止延长收集血液标本后处死大鼠，无菌条件下收集左侧胫骨标本，迅速行左侧胫骨x线摄片检查。检测实验第8、10周及处

5、死动物前血清标本中的三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、胰岛素(FINs)、空腹血糖(FBGl。骨痂组织标本HE染色观察牵引间隙内骨痂生成情况，并进行组织学定量分析牵引间隙内骨痂新骨的形成面积以及骨髓腔内单位面积脂肪细胞的数量。将保存好的左胫骨骨痂标本分别做蛋白印迹法(Western．Blot)和实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real．timeQuantitativePCRDetectingSystem，QPCR)检测。结果：喂养8周后，实验组大鼠血清FINs、TG和TC较对照组升高(P<0．01)，FBG则无明显差

6、异(P>0．05)。实验10周及实验结束时，实验组大鼠TG、TC和FBG较对照组升高(P<0．01)，而FINs则无明显差异(P>0．05)。X线摄片显示：两组大鼠胫骨牵引间隙内均有骨痂生成，但实验组骨折断端牵引间隙内骨痂生成较对照组明显减少。骨痂组织HE染色示：实验组较对照组的微骨柱(MCF)明显减少，且排列紊乱，微骨柱变短、变小；初始基质前沿(PⅧ)减少。而骨痂的组织学定量分析则显示：实验组骨痂内新骨的形成面积较对照组减少而髓腔内单位面积脂肪细胞数量增多(P<0．01)。W．B及QPCR检测则显示：实验组较对照组

7、骨痂组织中Wnt[3．cateninII表达降低(P

8、allusandtype2diabetesfractureheatingdisorderABSTRACT：Objective：Toestablishfracturetractionmodeloftype2diabetesratsandtodiscusstherelationshipbetweenexpressionchangingofWm6一c