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时间:2019-03-03
《上皮间质转化在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、复旦大学万方数据硕士学位论文上皮间质转化在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用研究院系(所):中山医院专业:口腔临床医学姓名:杨斐导师:龚逸明副教授指导小组成员:余优成教授丁小军副教授二零一四年四月万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.6日U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第一部分环孢素所致牙龈增生
2、大鼠动物模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..13讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..16第二部分上皮间质转化在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..25讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..30第三部分microRNA在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.33材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..38讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..39全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..40参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46综j述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..477附蜀匙⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4754致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.56III万方数据上皮间质转化在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用研究复旦大学硕士研究生论文中文摘要环孢素所致牙龈增生严重影响患者的牙龈健康和咀嚼功能,影响患者生活质量。了解环孢素所致牙龈增生的发病机制对临床防治具有重要意义。上皮间质转化是指上皮细胞在特定的生理
5、和病理情况下向间充质细胞转分化的现象。组织学研究发现,增生的牙龈组织除了在间质层有明显的纤维化以外,上皮组织出现显著的增厚,伸长的上皮钉突伸展进入下层的附着组织内;同时,免疫组织学研究发现环孢素所致药物性牙龈增生中,上皮组织E.Cadherin表达明显下调,而成纤维细胞特异性蛋白表达明显上调。我们推测上皮间质转化在环孢素所致牙龈增生中起了一定的作用。本实验通过大鼠动物模型的建立,研究上皮间质转化相关标志物(TGF—p1,E-Cadhefin,ZEBl,ZEB2和Snaill)及一系列相关microRNA在环孢素所致牙龈增生中不同时期的表达变化,进
6、一步探讨上皮间质转化在环孢素所致牙龈增生中的作用。材料和方法第一部分环孢素所致牙龈增生的大鼠动物模型的建立选取SD大鼠36只,分为实验组和对照组,每组18只。实验组每日皮下注射环孢素10mg/kg,对照组注射同剂量生理盐水。分别于用药后20天、40天和60天将两组中各6只动物处死,将大鼠下颌牙龈组织固定、脱钙和包埋,通过HE染色于显微镜下观察牙龈上皮组织在用药后的形态学变化。第二部分上皮间质转化在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用选取实验组和对照组大鼠下颌第一磨牙颊侧牙龈组织,通过免疫组化、实时定量PCR和Westernblot检测大鼠牙龈组织内TG
7、F.p1、E.Cadherin、ZEBl、ZEB2和Snaill等上皮间质转化标志物在用药后不同时期的表达变化。万方数据上皮间质转化在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用研究复旦大学硕士研究生论文第三部分microRNA在环孢素所致大鼠牙龈增生中的作用选取实验组和对照组大鼠下颌第一磨牙颊侧牙龈组织,通过实时定量PCR检测用药后20天、40天和60天时一系列与上皮间质转化和组织纤维化相关的microRNA的表达变化。结果:第一部分:显微镜下可见服用环孢素40天和60天后,大鼠牙龈组织上皮层厚度明显增加,细胞层数增多,棘细胞层和角化上皮层增厚,上皮钉突形成
8、并向间质延伸;同时,间质厚度明显增厚,内可见大量胶原纤维和少量血管。第二部分:实验组大鼠牙龈组织中TGF.p1、ZEBl和ZEB2的蛋白
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