配伍对天麻中活性成分天麻苷元在大鼠体内分布影响探究

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1、配伍对天麻中活性成分天麻昔元在大鼠体内分布影响探究［摘要］该文采用高效液相色谱法测定各组织匀浆中天麻昔元的浓度，研究配伍前后天麻昔元在大鼠体内组织分布的变化，包括心、肝、脾、肺、肾、脑组织。研究表明天麻昔元在肾脏、肝脏、心脏、肺脏、脾脏、脑组织中均可分布，天麻、川苇配伍后，肝、肾中天麻昔元的含量不同程度的下降，肺、脑中含量上升，说明川苇对天麻活性成分天麻昔元的体内分布具有一定的影响，川苇能够促进天麻昔元向肺和脑组织分布。该文为天麻和川苇配伍治疗脑部疾病提供一定的科学依据。［关键词］川苇；天麻；配伍；天麻昔元；组织分布中药

2、成分复杂，复方给药通常会发生药味成分之间的相互作用，使药物活性成分在体内的药动学行为发生改变［1-2］o川苛、天麻为治疗头痛的经典药对，具有活血化瘀、息风止痛的功效。其中，川苇［3］为伞形科多年生草本植物川苇LigusticumchuanxiongHort.的根茎，具有活血化瘀，行气开郁的功效；天麻［4］为兰科天麻属天麻GastrodiaelataBl.的干燥块茎，具有平肝抑阳，息风止痉的作用。文献表明［5-6］,川苇具有“上行头目”的作用，常常与其他药物配伍治疗头痛。本文研究天麻川苇配伍前后天麻活性成分体内分布情况，探

3、讨川苇天麻的配伍规律以及川苛引药上行的作用，从而为治疗脑部系统疾病的新药研究提供新思路和新方法。1材料Agilent1200HPLC（包括脱气机，四元泵，柱温箱，VWA检测器）；AgilentLC系统化学工作站（美国Agilent公司）；KQ-300E超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）;SIGMA2K15C台式高速冷冻离心机（德国SIGMA公司）；BT-2000氮气吹干仪（北京八方世纪科技有限公司）。川苇提取物（南京泽朗医药科技有限公司，批号100809）；天麻提取物（南京泽朗医药科技有限公司，批号SL2010010

4、3）；天麻昔元对照品（仪征市鼎信化工有限公司，质量分数为99.5%）；乙睛、甲醇为色谱纯；双蒸水（自制）。SD大鼠体重（200±20）g,雌雄各半，由江西中医学院实验动物中心提供，合格证号SCXK（赣）2005-0001o2方法2.1生物样品预处理方法［7］取出组织样品剪碎，按质量的2倍量加生理盐水匀浆，于4000r•min-1,4°C离心15min,得各组织匀浆液。取各组织匀浆液1mL置5mL离心管中，加入3mL甲醇-乙月青（1:4）,涡旋震荡2min,于12000r・min-1,4°C离心15min,取上清液于40°

5、C水浴N2吹干，残渣用100uL流动相复溶，于12000r・min-1,4°C离心15min,取上清液20uL进样HPLC测定。2.2色谱条件LunaC18色谱柱(4.6mmX250mm,5um)；流动相为乙睛-水(3:97)；波长221nm；柱温30°C；流速1mL・minT；进样量20卩L。2.3数据分析所有实验数据的测定值均以土s表示。实验数据处理采用药动学参数为DAS2.0分析选用统计矩参数，采用GraphPadPrism5作图表，统计学分析使用SPSS13.0进行配对t检验。2.4对照品溶液的配制精密称取天麻昔

6、元(gastrodigenin)对照品25mg用流动相溶解并定容至25mL量瓶中，配制成1g・L-l的对照品溶液，即为对照品储备液，于4£保存备用。2.5专属性考察取空白组织匀浆，以及加入适量天麻昔元和灌胃给药30min后的心、肝、脾、肺、肾、脑组织匀浆，按2.1处理后，进样测定。结果表明在本实验的色谱条件下，方法专属性好，组织中内源性物质不干扰天麻昔元的检测，天麻昔元峰形较好，见图1(以大鼠脑组织为例)。2.6标准曲线的制备精密量取天麻昔元对照品储备液适量，用流动相稀释制备系列标准溶液，加入到大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑

7、组织匀浆液中，制成含一定量天麻昔元组织匀浆液样品然后按照生物样品预处理方法处理后进样分析，记录峰面积。以测得生物样品的峰面积(Y)对浓度(X)进行回归计算，得各组织匀浆样品中天麻昔元的标准曲线，见表lo2.7精密度考察取心、肝、脾、肺、肾、脑组织匀浆液,精密加入天麻昔元对照品溶液适量，配制成含一定量天麻昔元高、中、低组织匀浆液。然后按2.1处理样品，同1d平行测定6次，连续测定3d,测得天麻昔元的峰面积，计算日内、日间精密度。结果高、中、低3个浓度的日内精密度RSD分别为4.0%,8.6%,12%及日间精密度RSD分别为

8、5.9%,7.7%,9.7%,符合分析要求。2.8回收率考察取心、肝、脾、肺、肾、脑组织匀浆液,精密加入天麻昔元对照品溶液适量，配制成含一定量天麻昔元高、中、低3个浓度的组织匀浆液。另取一定体积心、肝、脾、肺、肾、脑组织匀浆液，按2.1处理后加入与前面相同量的对照品溶液，用流动相溶解制成含天麻昔元高、中、低3个浓度的