sigma受体1在大鼠视网膜中的表达及与神经节细胞ampa受体的相互作用

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1、万方数据论文独创性声明本论文是我个人在最师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特-另tl：Drl以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均己在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名：越日期：论文使用授权声明7．0／嗷歹．刃本入完全了解复旦：赶学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，．可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。⋯轹邀一：襻吼幽一万方数据指导小组成员名单：钟咏梅教授复旦大学神经

2、生物学研究所杨雄里教授中国科学院院士复旦大学神经生物学研究所翁史钧副教授复旦大学神经生物学研究所万方数据目录目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．：⋯⋯⋯⋯l缩略语及符号⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4一、中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7二、英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9三、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12(一)、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12(二)、材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．171．免疫荧

3、光组织化学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．171．1神经节细胞的逆行标记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．171．2免疫组织化学标本的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯171．3免疫荧光组织化学反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯171．4共聚焦激光扫描显微镜观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．192．Westernblot分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．193．RT．PCR分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．204．大鼠视网膜薄片标本的膜片钳记录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．204．1大鼠视网膜薄片标本的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．

4、204．2视网膜薄片标本膜片钳记录的实验装置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2l4．2．1灌流和加药系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯214．2．2成像系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l4．2．3刺激系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯224．2．4记录系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯235．钙成像⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．245．1钙成像的原理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．245．2钙成像标本的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯255．3钙成像的数据采集⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯256．溶液和药品⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．266．1常规溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26．1．万方数据目录6．1．1细胞外液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．266．1．2电极内液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯276．2酶解液的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．276．3实验中所用的工具药配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯277．数据分析处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(三)、实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯311．6R1在大鼠视网膜上的分布⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l1．16R1mRN

6、A在大鼠视网膜中的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．311．26R1抗体的特异性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯311．36R1在大鼠视网膜上的分布⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．321．46R1在水平细胞和双极细胞上的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．331．56R1在无长突细胞上的分布⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．351．66R1在神经节细胞上的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．371．7小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．382．6R1的激活对大鼠视网膜ONGC上AMPA受体介导的光刺激诱发的兴奋性突触后电流的调节⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯392．1大鼠

7、视网膜ONGC的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯392．2大鼠ONGC上AMPAR介导的光刺激诱发的兴奋性突触后电流的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．402．36R1的激活压抑AMPAR介导的L．eEPSC⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．412．46R1的激活不影响突触前BC谷氨酸的释放⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯433．6R1压抑AMPAR介导的L．eEPSC的胞内机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯433．1G蛋白参与SKF压抑AMPAR介导的L．eEPSC⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯433．2PLC／P