溶血对氧化酶法测定葡萄糖的影响与纠正

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1、湖北中医药大学硕士学位论文溶血对氧化酶法测定葡萄糖的影响与纠正姓名：解茂阳申请学位级别：硕士专业：临床检验诊断学指导教师：谢圣高20120509摘要目的溶血发生时，为避免重新采血对患者的损伤，选用血浆游离血红蛋白浓度来衡量溶血程度标准，采用双波长法测定葡萄糖浓度，并探讨溶血对葡萄糖氧化酶法测定血糖的干扰与纠正方法。方法溶血对于血糖测定的多因素干扰中血红蛋白的影响最为显著，对于血糖测定可以选用血浆游离血红蛋白浓度来衡量溶血程度标准，即溶血后血糖值与血浆游离血红蛋白浓度呈一定关系．选用健康人血液标本，要求无黄疸、无溶血、无脂血。按美国临床和实验

2、室标准研究院(CLSI)文件配制不同浓度的血红蛋白溶液，建立低浓度、中浓度、高浓度三种溶血程度的反应体系，与血浆及葡萄糖校准液按一定比例混合制成溶血样本，在UV．VIS8500紫外／可见分光光度计200nm．650nm波长范围内扫描，得到两条A-k匹l线，进行叠加比较，选择主波长及副波长。使用葡萄糖氧化酶法及双波长法对溶血前和溶血后标本进行测定，可以得到3个参数：不同的溶血程度(x)、葡萄糖的氧化酶法测定浓度(Y)、葡萄糖的真实浓度(z)，利用SPSSl3．0进行二元一次回归与统计学分析，再比较经回归纠正前后的相对偏差，考察偏差是否在允许范

3、围内。根据美国CLlA’88能力比对检验的葡萄糖分析质量要求的相对偏差在允许范围的4-10％以内判断为可接受，比较经回归纠正前后的相对偏差，考察是否在允许范围内。对样本溶血纠正前后的数据进行配对t检验，观察纠正效果。结果溶血样本的葡萄糖测定值较真实值偏低。随着溶血程度的加深，干扰越明显。总的回归方程为Z=0．416+0．054X+1．015Y，相关系数r=0．974(P<0．01)。在经回归纠正前后的相对偏差分别为13．4％、7．7％(P>0．01)，纠正后在允许范围(10％)之内。结论溶血对氧化酶法测定葡萄糖的干扰比较复杂，主要有三个方面

4、：①血红蛋白：红细胞破裂后释放的血红蛋白吸收光谱与氧化酶法部分重叠，表现为正干扰。同时，血红蛋白的含铁血红素具有拟过氧化物酶的活性，也能催化酚、4．氨基安替比林(4-AAP)反应，生成红色醌亚胺，表现为正干扰。②谷胱甘肽：红细胞破裂后释放谷胱甘肽可竞争过氧化氢而使测定结果偏低，表现为负干扰。③稀释：红细胞内的葡萄糖浓度比红细胞外约低20％，红细胞破裂后相当于血浆(血清)被稀释，使测定结果偏低，表现为负干扰。溶血对葡萄糖氧化酶法有负干扰，可以通过回归方程进行纠正。关键词：溶血；葡萄糖；干扰；纠正硕士研究生：解茂阳导师：谢圣高Influence

5、andcorrectionofhemolysisondeterminationofglucosewithglucoseoxidasemethodSpecialty：ClinicalLaboratoryDiagnosticsAuthor：XieMao—yangTutor：XieSheng—gaoAbstractObjectiveToavoidtheinjuryforretakingbloodtopatientswhenhemolysisoccurs，plasmafreehemoglobinconcentrationwaschosedtomea

6、surethedegreeofhemolysisstandard，doublewavelengthsmethodwasadoptedtodeterminetheconcentrationofglucose，andtodiscusstheinfluenceofhemolysisonthedeterminationofbloodsugarandthemethodofcorrection．MethodsDuringhematolysis，thehemoglobinmostaffectedtheglucosedetermination，andpla

7、smafleehemoglobinconcentrationwaschosedtomeasurethedegreeofhemolysisstandard．Glucoseconcentrationsandplasmafreehemoglobinconcentrationsshowedacertainrelationship．Healthyhumanbloodspecimenswerecollected，withoutjaundice，hemolysisandlipemia．AccordingtothedocumentfromtheAmeric

8、anClinicalandLaboratoryStandardsInstitute(CLSI)，hemoglobinsolutionwasprepared．Hemolysissa