后部板层角膜供体材料的应用实验研究

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1、南昌大学硕士学位论文后部板层角膜供体材料的应用实验研究姓名：凌玲申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：周文天20120604摘要目的：建立大鼠同种异体无缝线前、后板板层角膜移植(LKP)动物模型。观察角膜上皮细的生长及组织学特点。方法：选取Wistar大鼠27只541I[为供体制备前板(前弹力层+部分基质层)和后板(后弹力层+部分基质层)角膜植片；雌性SD大鼠108只为受体分为2组，每组54只，实验组行后板LKP，对照组行前板LKP，两组大鼠均右眼施行LKP手术，左眼为正常对照。用猪源纤维蛋白粘合剂(PorcineFibrinSealantKit)替代角膜缝线行

2、LKP，术毕行睑缘缝合术llJ。两组术后第1天拆除眼睑缝合线，前3天滴用O．5％左氧氟沙星滴眼液(参天制药可乐必妥)和妥布霉素地塞米松滴眼液(Alcon公司典必殊)4次／日，以后滴眼药水2次／日，1月后停药。两组术后3、7、14、28、42及56天裂隙灯下观察术眼并行排斥反应指数限I)评分，荧光素钠染色观察角膜缺损并用photoshop软件计算角膜上皮生长面积。各观察时间点处死实验组和对照组大鼠各9只，取术眼角膜制备HE染色标本、透射电镜标本观察角膜上皮各层细胞形态、层数同时行角膜K12免疫荧光检测角蛋白表达水平。结果：选入的108只SD大鼠在实验过程中因麻醉过度

3、死亡占14只，术后植片出现感染占7只，均被清除后得到及时补充，108只SD大鼠全部进入最终结果分析。裂隙灯下观察：实验组和对照组角膜植片混浊水肿过程相同，Ⅺ图表曲线几乎重叠，其峰值及整体曲线走向大体一致，整体Ⅺ指数呈下降趋势。荧光素钠染色：两组着色范围缩小时间相同。photoshop画图软件辅助分析角膜上皮生长面积观察到两组术后各时间点角膜上皮爬行面积差异甚小。对Ⅺ和Fls评分数据及上皮生长面积，采取两样本t检验，以a=0．05，p<0．05为数据有统计学意义，计算得出各时间点p>O．05，差异均无统计学意义。HE染色切片光镜观察：两组术后均从早期上皮生长不典型到

4、后期上皮结构均长出，形态接近正常上皮细胞。透射电镜观察：早期两组角膜表皮细胞微绒毛均稀疏，至后期五层上皮细胞结构均长出，微绒毛生长致密。同时观察到角膜上皮基底膜与后弹力层连接有间隙，而与前弹力层连接紧密。K12免疫荧光检测：两组术后免疫荧光检测可见上皮细胞从早期的弱荧光到后期的强荧光。结论：1、首次建立大鼠同种异体无缝线前、后板LKP动物模型。II摘要2、通过各项指标检测，观察到两组在不同时间点上皮爬行的速率、面积及生长形态大致相同，证实后板同样能作为角膜上皮细胞生长的载体，为后板进一步应用提供了实验和理论依据。3、通过透射电镜观察前、后板LKP术后角膜上皮移行中

5、超微结构的差异，为后续科研工作提供了重要参考。4、猪源纤维蛋白粘合剂成功应用于大鼠板层角膜移植，达到无缝线手术目的，为其进一步应用于无缝线角膜移植手术提供了实验基础。关键词：板层角膜移植；前板层角膜供体；后板层角膜供体；猪源纤维蛋白粘合剂；IIIAbstractABSTRACTObjective：Toestablishthelamellarkeratoplastymodelinrats，ComparethedifferentmaterialslarnellarkeratoplastyDescemet+partofthestroma)andfindconversio

6、n．(Bowmanlayer+partofthestroma、outtheclinicalfeaturesandpathologicalMethods：TheSDratswererandomlydividedintotwogroups，54ratsineach．group．27Wistarratswereusedasdonorgroup．ThetwogroupsofratswereusedforlamellarkeratoplastybyFormerlamellarandPost—lamellar．Aftersurgery3,7，14，28，42and56days

7、byslitlampandsodiumfluoresceinstainingofcornealepithelium，killedtheexperimentalgroupandcontrolgrouprats9，takethecorneapreparationofHEstained，transmissionelectronmicroscopyspecimensandimmunofluorescencedetection。Results：108SDratsanesthesiaexcessivedeadl4，graftinfection7．Slitlampobserva

8、tion：