agilent_型高效液相色谱仪标准操作规程

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1、Approvals批准Dept.部门Occupation职务Signature签名Date日期Draftsman起草人TC技术中心职员Verifier审核人QD质量管理部文件主管Verifier审核人QD质量管理部经理Approvedby批准人GMO技术中心总监7/71目的建立Agilent1200高效液相色谱仪的操作规程,保证其正确使用。2范围Agilent1200高效液相色谱仪的操作与维护。3职责操作人员和责任人员对本规程的实施负责。4内容4.1组成G1322A脱气机、G1311A四元泵、G1329A自动进样器、G1330B自动进样器恒温器、G1315B可变波长检测器(DAD)、G

2、B16A柱温箱和一套Agilent1200CHEMSTATIONS软件(软件光盘与说明书原件由工程部保存),打印机。4.2在线清洗若实验的流动相中含有的缓冲盐和离子对等试剂干后会留下固体印迹的物质时,必须要进行在线清洗过程。首先配制好10%异丙醇溶液,经0.45μm有机膜抽滤后,装入已用滤过的10%异丙醇溶液洗过三遍的洁净玻璃瓶内,调整流量为2~3滴/分钟,10%异丙醇溶液必须每周更新。4.3开机接通电源,打开计算机,等计算机启动成功后,含四元泵的Agilent1200高效液相色谱仪系统:从上到下,依次打开脱气机、泵、进样器、进样器恒温器、柱温箱和多波长检测器。约30秒钟后,各部件自检

3、完毕,进入待机状态,指示灯为黄色或无色。双击桌面上的Instrument1Online,计算机进入工作站的MethodandRunControl操作界面。画面如下所示。7/74.4色谱条件的设定4.4.1方法的编辑●在methodandruncontrol状态下,单击“method”选择“editentiremethod”,请先在复选框中选择method中需要编辑的项目。●进入methodinformation在methodcomments中输入方法的名称及相关描述,参数设置完毕后单击OK。●进入泵参数设置画面,设置泵流速(ml/min),流动相组成,冲洗梯度,停针时间等,参数设置完毕

4、后单击OK。●进入columnthermostattedmethod编辑状态,选择柱温箱温度,设置完毕单击OK。●进入VWD编辑状态,选择方法中所需波长、峰宽、响应时间等,参数设置好单击OK。●进入signaldetails编辑画面,选择下拉菜单中的VWDIA进行参数设定,点击“DAD”图标,点击“SetupDADSignals”,在“Signals”下方的空白处输入所需的检测波长,并在前面的方框里画“√”设置完毕单击OK。●进入编辑积分表画面,对所需积分的峰斜率、峰宽、峰高、峰面积、肩峰等参数进行设定,设定完毕后单击OK。●进入specifyreport编辑画面,单击screen前的

5、方框,设置报告。使其输出结果到屏幕,在calculate选项中选择percent,在reportstyle选项中选择short,单击singnaloptions设置打印信号范围,单击OK。●进入时间编辑,在dataacquisition和standarddataanalysis的复选框中打×,选择好后单击OK,则方法编辑完毕。●在methodandruncontrol状态下,单击method,选择savemethodas选项,编辑方法名存储。4.4.2进样操作4.4.2.1调用方法进入methodandruncontrol状态下,单击选择method选项,单击loadmethod选择所

6、要使用的方法。此时系统将根据所选择的方法进行相应的设置。开始前请根据方法对相应的参数例如:泵参数、自动进样器参数、自动进样器恒温器参数设定、柱温箱参数设定、检测波长设定等进行验证是否与方法设置中的一致。4.4.2.2自动进样序列的设定a单个样品进行分析在命令栏“Runcontrol”下,选择“SampleInfo……”或单击快捷操作的“一个小瓶”图标,然后单击样品信息栏内的小瓶,选择“SampleInfo……”,即打开了样品信息页面,可输入操作者(OperatorName)、数据存贮通道(Subdirectory)、进样瓶号(Vial)、样品名(Sample7/7Name)等信息,单击

7、“OK”,即完成。b多个样品连续进行分析●编辑新序列:在命令栏“Sequence”下,选择“NewSequence”;然后再在命令栏“Sequence”下,选择“SampleParameters”,可输入操作者(OperatorName)、数据存贮通道(Subdirectory)等信息;然后再在命令栏“Sequence”下,选择“SequenceTable”或单击快捷操作的“三个小瓶”图标,单击样品信息栏内的样品盘,选择“SequenceTab

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