脱细胞猪心包膜对兔股骨骨缺损引导骨再生影响的实验分析

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1、分类号：R782密级：不保密UDC：610学校代码：11065硕士学位论文脱细胞猪心包膜对兔股骨骨缺损引导骨再生影响的实验研究侯佳丽指导教师赵保东学科专业名称口腔种植医学论文答辩日期2015年5月24日万方数据摘要目的：评价脱细胞猪心包膜材料的降解性，以及对兔股骨骨缺损引导骨再生的影响。方法：无菌条件下，选取新鲜猪心包。充分漂洗之后，经过0.05mol/LNaCl和1.5mol/LNaCl分别浸泡24小时、0.1%胰酶+0.02%EDTA消化24小时、0.5%TritonX-100浸泡冲洗，然后用0.03%戊二醛交联处理，得到脱细胞猪心包膜（acellularporci

2、nepericardium,APP）。成年新西兰大白兔18只，建立双侧股骨远端8*8*5mm骨缺损模型，随机一侧覆盖APP(APP组)，另一侧不盖膜（对照组）。分别于术后4周、8周和12周各处死6只兔子，取出股骨及未完全吸收的APP。进行大体观察，X线检查，DXA骨密度测量（BoneMineralDensity,BMD）和组织学观察。结果：①大体观察：18只兔子均未发生感染、死亡。术后4周、8周和12周，均可见膜表面有淡黄色纤维包囊存在。术后4周，APP组与对照组骨缺损处无明显差异。术后8周，APP组骨缺损边缘有大量新骨形成。术后12周，APP组骨缺损区域表面较平坦，对

3、照组骨缺损区表面凹凸不平。②X线观察：术后4周，APP组骨缺损区域低密度影，与对照组与APP组无明显差异。术后8周，APP组骨缺损边缘处骨小梁形成，对照组骨缺损边缘骨小梁形成数量少。术后12周，APP组缺损区骨密度明显高于对照组，骨小梁增粗。③BMD骨密度测量：术后4周、8周和12周，APP组的BMD值均高于对照组，有统计学意义（P＜0.05）。④组织学观察：对比猪心包膜脱细胞处理前后，见猪心包脱细胞完全，胶原纤维排列规则。术后4周，APP膜表面有大量炎性细胞浸润，APP组骨小梁数目稍多于对照组。术后8周，APP膜内可见毛细血管长入，骨缺损部位有大量新生骨小梁，对照组骨

4、小梁相对较少。术后12周，膜内成纤维细胞长入，约占2/3，缺损区骨小梁改建、变粗，对照组缺损表面纤维结缔组织占入其中，骨缺损中央部位见大量肌纤维细胞。结论：①对猪心包采用高、低渗溶液交替浸泡，胰酶+EDTA消化联合TritonX-100冲洗的方法可以达到有效地脱细胞处理而且很好的保存了猪心包的胶原结构。②APP胶原材料能够起到较好的引导性骨再生作用，加快成骨速度。其降解缓慢为新骨的再生提供足够时间。③APP在吸收的过程中，在膜周围形成纤维包囊，可能与戊二醛交联试剂存在一定细胞毒性有关。关键词：猪心包；引导骨再生；脱细胞；骨缺损万方数据Experimentalstudya

5、bouttheeffectofacellularporcinepericardiumguidedboneregenerationinrabbitfemoralbonedefectAbstractObjective:ToevaluatethedegradationofAPP,andtheeffectofAPPonboneregenerationinrabbitfemoralbonedefects.Method:Underasepticconditions,choosefreshporcinepericardium.Rinsethoroughly,0.05mol/LNaCl

6、and1.5mol/LNaClsoakedwith24hours,0.1%trypsin+0.02EDTAdigestedfor24hours,immersewith0.5%TritonX-100,crosslinkingwith0.03%glutaraldehyde,finallyAPPpreparation.Select18adultNewZealandrabbits,makingtheirbilateraldistalfemoralbonedefect8*8*5mm,randomlyinonesidecoveredwithAPP(APPgroup),theothe

7、rsidewithnomembrane(Controlgroup).Each6rabbitswerekilledonfourthweeks,eighthweekandtwelfthweekafteroperation,thefemurwereisolatedfromthespecimen.Thefollowingindicatorsweremeasured:generalobservation,X-rayexamination,bonemineraldensity(BMD)measurementandhistologicalobserva