载银介孔氧化硅新型纳米菌材料体外抗菌性能及生物相容性能的实验研究

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1、万方数据中图分类号』83．4UDC610博士学位论文学校代码密级10533载银介孔氧化硅新型纳米抗菌材料体外抗菌性能及生物相容性能的实验研究TheBroad-—spectrumAmimicrobialActivityandBiocompatibilityoftheMesoporousSilicaNanoparticlesEncapsulatedwithSilverNanocrystalsinvitro作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：哥『J指导老师：莫吴临床医学(八年制)外科学湘雅医学院胡

2、建中教授吕红斌教授论文答辩日期?!?：?!予刀答辩委员会主席中南大学2014年5月万方数据学位论文原创性声明本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其它人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：羹量．日期：盟年』月盈日学位论文版权使用授

3、权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：薹墨日期：盟年工月生El导师签日期：月翌目万方数据本课题由以下课题项目提供资金支持：1．2013年863面上项目：生物相容性纳米组织修复材料研制及应用。(课题编号：2013AA032203)2．2

4、013年湖南省科技厅科技计划重点项目：基于纳米载体的控释抗菌骨修复活性材料抑菌性能及生物学检测。(课题编号：2013GK2002)万方数据八年制博士学位论文中文摘要载银介孔氧化硅新型纳米抗菌材料体外抗菌性能及生物相容性能的实验研究摘要第一部分载银介孑L氧化硅新型纳米抗菌材料抗菌性能研究背景：载银介孔氧化硅(Ag．MSN)材料生物相容性好，机械性能佳，具有载药潜力及可控缓释药物能力，可望成为良好的骨替代材料抗菌载药颗粒。目的：本实验通过对该材料的体外抗菌性能及Ag+缓释特点进行研究，探讨其应用于填充慢性骨髓炎术后

5、骨缺损的可行性。方法：采用标准肉汤稀释法及OD600细菌生长曲线测定法检测不同浓度的Ag．MSN混悬液及MSN混悬液对于金葡菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌／脆弱拟杆菌和白色念珠球菌的体外抗菌效果。将Ag．MSN混悬液分别浸泡于50m1模拟体液(simulatedbodyfluid，SBF)中，于3h／6h／12h／ld／3d／7d／10d／14d采用火焰原子吸收光谱法检测Ag+浓度，绘制银离子释放曲线，检测材料的Ag+缓释特点。结果：Ag．MSN对于金葡菌／铜绿假单胞菌／大肠杆菌／脆弱拟杆菌的最小抑菌浓度(MIC)

6、均≤200ug／ml，而最小杀菌浓度(MBC)则分别为400／200／200／200ug／ml，中间浓度材料浸提液相对于对照组能显著抑制细菌生长；但材料对于真菌一白色念珠球菌无明显杀菌效果，在400“g／ml浓度下仅能抑制其生长；Ag．MSN各浓度组SBF浸泡液中的银离子总释放趋势基本一致，均于浸泡6小时后达到银离子释放的峰值，浸泡3d后银离子释放渐趋稳定，与浸泡14天内无明显差异400，200组在14天内均维持在银离子生物安全浓度与最小抑菌浓度MIC之间。结论：载银介孔氧化硅(Ag—MSN)材料在体外对金黄色

7、葡萄球菌／大肠杆菌／铜绿假单胞菌／脆弱拟杆菌有明显抗菌作用，对于白色念万方数据八年制博士学位论文中文摘要珠球菌有抑菌作用。其在SBF中具有良好的缓释效果，有望成为针对慢性骨髓炎的良好的新型骨替代材料抗菌载药颗粒。关键词：载银介孔纳米氧化硅，慢性骨髓炎致病菌，银离子释放第二部分载银介孑L氧化硅新型纳米抗菌材料对于成骨样细胞增殖分化能力的影响目的：检测不同浓度载银介孔氧化硅(Ag．MSN)及介孔氧化硅纳米颗粒浸提培养液的细胞毒性，及其对成骨样细胞增殖分化能力的影响，探讨其生物相容性及将来应用于填充慢性骨髓炎术后骨缺

8、损的可行性。方法：采用CCK8法检测不同浓度的Ag．MSN浸提培养液及MSN浸提培养液对于成骨样细胞的细胞毒性及对其增值能力的影响。分别于共培养1，3，7天时采用ELISA法检测与不同组别浸提培养液共培养后的成骨样细胞的碱性磷酸酶(ALP)，骨钙素(OC)的蛋白分泌量。实时定量PCR(qRT-PCR)法检测碱性磷酸酶(ALP)，骨钙素(OC)基因表达的变化。结果：在检测的3个时间点下，