安徽省水稻条斑病菌种群的致病型监测及其遗传结构分析

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1、万方数据DissertationforMaster’SDegreeDetectionofpathotypeofXanthomansoryzaepv．oryzicolapopulationandtheirgeneticstructureanalysisfromAnhuiProvinceSupervisor：AssociateProf．LixinZhangMasterCandidate：TaoHeMajor：PlantPathologyAnhuiAgriculturalUniversityHefei，Anhui，ChinaJune2014万方数据独创性声明本人声明所

2、呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：么il鱼签字日期：沙，尹年z月∥日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文件，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可以将学位论文的全部或部分内容

3、编入有关数据库进行检索，收录到《中国学位论文全文数据库》，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)。学位论文作者签名：垡i：鸯签字日期：矽，妒年／月／日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通信地址：指导教师签名：签字日期：移ptW-年占月多日电话：邮编：万方数据摘要水稻细菌性条斑病是由水稻黄单胞稻牛致病变种(Xanthomonasoryzaepv．oryzicola)引起的危害我国水稻牛产上的重要细菌性病害。水稻条斑病的发牛丰要受病原菌、品种抗性及气候条件三个丰要因素的影响。近年来该病害在

4、安徽省水稻产区的危害逐步扩大，已上升为水稻生产上的丰要病害。选育抗性品种是防治该病最有效的措施，但前提是探明该病原菌的致病类型及遗传背景，为此，我们于2009．2011年问对安徽省11个不同地区的水稻条斑病叶进行田间采集和病菌分离，并对该病菌种群进行了致病型监测和遗传结构分析，研究结果如下：1．水稻条斑病菌的分离和鉴定本研究采用平皿稀释法及BPA培养基对采集白安徽省11个不同地区的水稻病叶进行病菌分离，共随机获得94株代表性菌株。这些菌株在BPA培养基上表现出一致的培养性状，菌落呈淡黄色，圆形，表面光滑。将分离所得到的菌株通过针刺法接种到孕穗期的水稻感病品种“金

5、刚30”上进行致病性测定，结果发现分离得到的94个菌株均能使水稻感病品种“金刚30”发病。进一步将分离得到的94个菌株进行PCR检测，结果发现94个菌株在PCR扩增后检测出扩增信号，故可确定该分离的94个菌株为水稻条斑病菌。2．水稻条斑病菌种群的致病型分析本试验采用IRBB5、IRBBl4、IR24、IRBB4、IRBB2l和金刚30等6个鉴别品种对选取自安徽省11个不同地区的72个典型的水稻条斑病菌株进行致病型分析，结果表明：供试的72个水稻条斑病菌致病型分化明显，可以划分为I、II、III、Ⅳ、V、Ⅵ等6个致病型。按照致病型所占频率从高到低分别为：致病型I>

6、致病型II>致病型III>致病型Ⅵ>致病型Ⅳ>致病型V。其中致病型I为优势致病型，占总供试菌株的27．8％。从供试菌株在鉴别寄丰上的致病性反应可以看出，来自怀远和凤阳的水稻条斑病菌株毒性很强，来自明光的水稻条斑病菌株的毒性较弱，研究结果表明水稻条斑病菌的致病型与地域分布具有一定相关性。3．水稻条斑病菌遗传多样性和遗传分化分析采用CTAB法对来自安徽省11个不同地区的水稻条斑病菌进行基因组DNA的提取，利用BOX、REP和ERIC三组引物对其基因组DNA进行PCR扩增，进而分析其遗传多样性情况。结果显示，3组引物共扩增出了49条指纹条带，且所扩增出的DNA条带均为

7、多态性条带，条带多态性百分率为100％，扩增后的分子片段大小均集中在100．2000bp之间。通过对比发现，REP引物的分辨率最高，可产牛指纹丰带2～13个，BOX引物次之，可产牛指纹丰带2～10个，ERIC引物分辨率最低，产生指纹丰带l～8个。为了系统的了解安徽省水稻条斑病菌种群的遗传多样性水平和遗传分化，依据供试菌株的地理区域特点，本试验将来白安徽省11个不同地区的水稻条斑病菌种群划万方数据分为皖东南、皖西南、皖中、皖东北和皖西北5个群体。通过POPGENEversion1．3．1软件分析水稻条斑病菌的群体遗传多样性可以得出，安徽省水稻条斑病菌5个地理区域群

8、体遗传多样性参数平均水平