鹿茸岭南特色饮片(极薄片)的炮制工艺及质量研究

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1、广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名生查叁日期：力洋年锕，z日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许

2、被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：盘：垫：鱼论文导师签名日期：驯年细目的：摘要对鹿茸片(药典)及鹿茸岭南特色饮片一一鹿茸极薄片两种鹿茸饮片进行主要成分含量研究分析，揭示其主要成分特点，阐释鹿茸岭南特色炮制的合理性；对炮制工艺关键环节进行单因素试验优化，并引入新型的常温干燥方法进行相应的正交优化实验，规范鹿茸极薄片炮制，促进生产效率：对鹿茸极薄片

3、的质量进行全面的研究，起草相应的质量标准草案和起草说明；建立鹿茸极薄片指纹图谱，探讨鹿茸极薄片与《药典》鹿茸片的区别，揭示鹿茸岭南特色饮片炮制内涵。方法：1主要成分含量测定方法研究利用考马斯亮蓝显色法测定水溶性蛋白，钼蓝显色法测定总磷脂，硫酸一蒽酮法测定总多糖，茚三酮显色法测定总氨基酸，水溶性浸出物热浸法法测定水溶性浸出物溶出速率，采用水溶性总蛋白、总磷脂、总多糖、总游离氨基酸4大类成分及水溶性浸出物溶出速率作为评价指标，对鹿茸极薄片和鹿茸片(药典)的饮片样品进行全面分析。2炮制工艺研究以润透程度及

4、软化程度为指标，对鹿茸极薄片软化炮制工艺中的润制和蒸制工艺进行单因素优化试验；引入新型常温干燥技术，以醇溶性浸出物含量、总游离氨基酸含量及外观形状为试验指标，以干燥温度、干燥时间、及物料密度为考察因素，对干燥工艺进行优化试验。3质量研究参照《中国药典》2010版的检测方法，对水分、醇溶性浸出物、总灰分进行测定，建立相应的性状、显微、薄层鉴别及总游离氨基酸含量测定方法，以实验结果为依据起草相应质量标准(草案)及起草说明。4高效液相指纹图谱运用HPLC—PDA法对鹿茸极薄片盐酸提取物进行全波长扫描，确定

5、基线稳定，提供信息量比较丰富的检测波长，最终的色谱条件为，GRACEPrevailTMC18柱(250×4．6mm5pm)：0．144％---氟乙酸水溶液一0．1三氟乙酸乙腈溶液为流动相，梯度洗脱，270nm为检测波长；柱温32。C；流速0．9mL／min；进样量25UL。以尿嘧啶作为参照峰，建立鹿茸极薄片指纹图谱，获得共有峰信息，并运用“中药指纹图谱相似度评价系统2004A版”对共有峰信息进行相似度分析。结果：l主要成分含量测定方法研究鹿茸极薄片的总游离氨基酸及总多糖含量与饮片等级之间呈正相关关系

6、，而总磷脂及水溶性蛋白含量与饮片等级之间无相关关系；鹿茸极薄片的水溶性蛋白、总磷脂及总多糖含量都较鹿茸片高，分别为0．8296、0．09796、0．23％，其中水溶性蛋白含量差异具统计学意义；总游离氨基酸含量以鹿茸片(药典)的含量较高，均值为1．5096，且差异具统计学意义；鹿茸极薄片水溶性浸出物溶出速率明显比鹿茸片(药典)快，在10min时己溶出94．2％的水溶性浸出物，鹿茸片(药典)的只有60．6％。2炮制工艺研究根据试验结果和岭南天气特点，选择的最佳润制工艺为：米酒用量药液比为1：3；在春夏季

7、节较嫩茸段润制3h，较老茸段润制5h；在秋冬季节润制较嫩茸段润制4h，较老茸段润制6h；闷润2d；较嫩鹿茸段第一次蒸制时间为2h，较老鹿茸第一次蒸制时间为3h；鹿茸段第二和第三次蒸制时间为10min。根据试验结果及考虑生产效率及成本，最后确定鹿茸岭南特色饮片干燥工艺为35"C干燥4小时，干燥时鹿茸极薄片物料密度为99，与传统干燥方法相比，经优化后的工艺耗时最短，干燥品醇溶性浸出物及总游离氨基酸含量较高。3质量研究建立了鹿茸极薄片性状、显微、薄层鉴别和总游离氨基酸含量测定方法，分析了各鹿茸极薄片水分、

8、浸出物、总灰分及总游离氨基酸含量的特点，选择了水分含量、醇溶性浸出物及总游离氨基酸含量为质量标准测定项。4高效液相指纹图谱建立了鹿茸极薄片高效液相指纹图谱，所建的10批鹿茸极薄片HPLC指纹图谱共有峰有20个，分析比较了不同炮制方法及规格的鹿茸饮片的指纹图谱相似度，10鹿茸极薄片的相似度均在0．925以上，批提示不同购买地不同规格的鹿茸薄片存在一定差异，但差异不大，而不同炮制方法的鹿茸饮片存在一定差异，但成分种类基本一致，只是部分成分含量存在差异。II结论：1主要成分