间断低氧预适应对大部肝切除手术术后残肝中epo和hgf的影响

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1、李鹏飞：问断低氧预适应对大部肝切除手术术后残肝中EPO和HGF的影响第一部分间断低氧预适应对大部肝切除手术术后残肝中EPO和HGF的影响中文摘要1、目的：本实验在建立SD大鼠大部肝切除术(Majorhepatectomy，MH)模型的基础上，术前对受体大鼠给予问断低氧预适应(Intermittenthypoxicpreconditioning，IHP)干预，研究低氧预适应通过EPO和HGF途径对大鼠残肝的影响，通过检测术后血清中丙氨酸转氨酶(alanineaminotmnsferase，ALT)和天冬氨酸转氨酶(aspar

2、tateaminotransferase，AST)含量变化，肝组织匀浆液EPO和HGF含量变化，肝再生度、肝再生指数，肝脏超微结构变化，以及应用免疫组化方法检测肝组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况等来反映大部肝切除术后残肝功能及残肝再生变化及规律。对比间断低氧预适应组(IPHC组)与单纯肝切除组(MH组)和假手术组(S组)的上述指标的变化探寻低氧预适应通过EPO和HGF途径对大部肝切除术后残肝组织影响关系，从而为临床大部肝切除术采取合理的术前干预手段减轻残肝脏组织损伤和促进残肝再生提供理论依据和可能的技术路径。2、

3、方法：2．1．实验动物分组及处理：SD大鼠，将120只洁净SD大鼠简单随机分为3组：假手术组(S组)：单纯大部肝切除组(MH组)，在肝门阻断下切除肝脏的肝左外叶、左内叶、中叶，肝门阻断时问为15min；间断低氧预适应组(IPHC组)，术前l周将大鼠置于氧气体积分数10％的低氧环境中，每天1次，每次60min。1周后在肝门阻断(15min)下行大部肝切除术(手术方式同MH组)。2．2标本采集及相关检测指标：分别在术后2h，6h，12h，24h，48h，72h，120h，168h处死大鼠，每个时间点5只，经腹主动脉采血做肝功能

4、检测，迅速完整切取全部残肝组织，计算肝再生度和再生指数；取残肝三角叶中央1era*1cm*1cm大小肝脏组织检测残肝中EPO和HGF含量；取肝三角叶部分组织块，10％甲醛固定，石蜡包埋、切片，以备PCNA，三角中央取大小约l幸l幸lmm肝组织，迅速戊二醛固定，以做电镜观察。3、结果：血清肝功能(AST／ALT)显示：IPHC组介于MH组与S组之间，有统计学差异(P<0．05)；三组肝组织透射电子显微镜观察：MH组24h时肝细胞肿胀，线粒体肿胀，呈气球样改变，扬州大学硕士学位论文lIIIIIIIllll1IIIIIIIIII

5、2Y2631995‘________________—-基质加深、减少，呈絮状改变，嵴减少，排列紊乱，内质网上核糖体大量脱落。IPHC组肝细胞线粒体肿胀、嵴减少较MH组。S组细胞形态正常；增殖细胞核抗原(PCNA)：MH组术后2h，6h，12h时PCNA的表达在较低水平呈缓慢递增的趋势到24h时明显增加，至术后72h达高峰，以后逐渐下降。IPHC组肝组织中PCNA的表达较MH组明显增加(P<0．01)，且在48h时PCNA表达量已由显著增加，在72h时达高峰，以后逐渐下降；残肝组织中EPO水平：三组术后残肝组织中EPO水平

6、具有显著统计学差异(P<0．05)，在EPO随时问变化趋势图中可见IPHC组的血中EPO含量介于S组与MH组之间，且IPHC组在72h内明显高于M}I组；残肝组织中HGF水平：MH组与IPHC组有统计学差异(P=O．002<0．05)。IPHC组HGF表达均高于MH组，二者变化规律相似，在24h时HGF量达高峰，以后逐渐递减。4、结论：低氧预适应能提高受体大鼠大部肝切除术后残余肝脏中EPO和HGF的含量水平，并对术后残余肝脏具有保护和促进再生的作用。【关键词】低氧预适应大部肝切除HGFEPO李鹏飞：间断低氧预适应对大部肝切

7、除手术术后残肝中EPO和HGF的影响3EffectsofintermittenthypoxicpreconditioningonEPOandHGFlevelinratliverafterpartialhepatectomyAbstract[Objective]：ThisstudyisestablishedinthemodelofSDratssubtotalhepatectomy,basedonthepreoper—ativeintermittenthypoxiainrats．Aftersurgery,wedetectedt

8、heEPOandHGFlevelsofthere-sidualliverandtherelatedindicatorsoftheliverregenerationandfeatures，bywhichthevaria—tionoftheEPOandHGFoftheresidualliveraltersu