钙离子和蛋白激酶a对背根神经节神经元胞体囊泡转运过程的调控

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1、分类号UDCY857009密缀——编号——中国科学院研究生院博士学位论文指导教师周童盟塞豆主垦盘鲎堕上渔生金鲎瞳独丝登茎盈宝堑申请学位级别谴±学科专业名称盈丝生堑茎论文提交日期2QQ互生5旦2璺旦论文答辩日期2Q笾生鱼旦8旦培养单位主国登茎瞳土盘垒全盘茎盈塞堕盘丝登鲎壁峦盟学位授予单位主国銎鲎睦壁宝垒瞳答辩委员会主席整益揸丝撞摘要钙离子和蛋白激酶A对背根神经节神经元胞体囊泡转运过程的调控在神经元和内分泌细胞，神经递质或激素的释放和突触囊泡转运是相当重要的生理过程。神经冲动打开电压门控的钙通道导致钙离子内流，引起钙离子依赖性的胞吐，然后突触前膜胞吞、回收形成囊泡，装载递质准备循环再利用

2、。胞吐和胞吞被认为是需要钙离子、蛋白激酶和GTP酶dynamin等参与的，但是关于钙离f和相关鬣白相互作用是如何调控囊泡转运这个问题还没有定论，在没有钙离：j：参与的情况下胞吐和胞吞是否能够以及怎样被调控也不清楚。本文采用膜电容测量、钙离子紫外光解和测量以及FM染料等方法，在背根神经节神经元胞体上研究胞吐和胞吞。(1)膜去极化能够诱发一种不需要钙离予和dynarnin参与的快速胞吞(rapidendocytosis，RE)，RE紧密偶联于不依赖钙离子而只需电压激活的分泌(calcium—independentbutvoltage—dependentsecretion，CIVDS)，R

3、E的幅度与CWDS的幅度以及刺激频率成萨比：蛋白澈酶A的阻断剂抑制商频电刺激引起的RE，丽蛋白激酶A的激动剂增强低频电刺激引起的RE，生化实验显示无需钙离子参与，电刺激可以赢接上调蛋白激酶A的活性。(2)在胞外无钙的环境下紫外光解升高胞内的钙离子可以引起钙离子依赖性的分泌(Ca2+dependentsecretion，CDS)，但是尘理性浓度的胞外钙离子可以抑制这种相同浓度的胞内钙离子所引起的CDS(extraeellularCa2+inhibitsCDS，ECIS)．PKA的激动剂能够增强CDS，去极化可以直接促进CDS，而且去极化的这种增强作雕可以被PKA的拮抗剂所抑制，在大鼠肾

4、上腺嗜铬细胞也能观察到类似的ECIS现蒙。综上所述，我们的实验揭示在DRG神经元上存在一种不依赖于钙离予和dynamin的快速胞吞，胞外钙离子可以阻断细腿内钙离子依赖的胞吐：而殂神经f乜活性和蛋白激酶A都调控这两种囊泡转运形式，且都不需要钙离子内流。这些发现扩展了已经建立的有关神经递质传递和突触囊泡转运的知识。钙离子和蛋白激酶^对背报神经节神经元胞体囊泡转运过程的调控关键词：背根神经节细胞，腿吐，胞吞，钙离子，蛋白激酶A2AbstraetModulationofvesiclescyclebycalciumandproteinkinaseAinsomaofdorsalrootgangl

5、ionneuronsWeiXiong(Neurobiology)DirectedbyZhuanZhouInneuronsandendocnnecells，neurotransmitter／laormonereleaseandsynapticvesiclecycleareimportantprocesses．TheopeningofvoltagegatedCa”channel(VGCClbynerveimpulseelicitsCa”influx，andresultingintracellularCa”transienttriggersCa”dependentexocytosis．Af

6、terthat，synapticvesiclesundergoendocytosis，灌cycle，andrefillwithneurotmnsmittersforvesiclecycle．Exoc)'osisandendocytosisarebelievedtorequireCa”，proteinkinaseandtheGTP鹊edynamin．However,mechanismsofvesiclecyclemodulationbyinteractionofCa2+andrelatedproteinshavenotbeendetermined．Moreover,itremainsu

7、nknownwhetherandhowevokedCXOCytosisandendocytosis缸eregulatedinabsenceofCa2+．Usingmembmallecapacilancemeasurem髓t，photoreleaseandmeasurementofICaz+]，andFMdyemethods，westudiedregulatedexocytosisandendocytosisinsomaofdorsalrootganglio