包埋剂种类及性能

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时间:2019-03-01

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1、常用包埋剂种类及性能一.环氧树脂(epoxyresin)1.环氧树脂简介环氧树脂是一类具有末端环氧基的甘油多聚酯。它的分子中有两种反应基团,即环氧基团(epoxidegroup)和氢氧基团(hydroxylgroup)。其末端基团易与含有活性氢原子的化合物如胺类(如DMP-30,DMAE,乙二胺等,又称催化剂或加速剂)反应,使单体首尾相连接形成长链聚合物。此外,在单体中的氢氧基团能与有机酸酐(如MNA,DDSA,九烷基琥珀酸酐,NSA等,又称硬化剂或固化剂)结合,使单体分子形成横桥。所以,环氧树脂以单体渗入

2、细胞组织,而这种单体在一定的温度条件下,在硬化剂和加速剂作用下,就形成一个非常耐溶剂和耐化学腐蚀的交链稳定的三维空间聚合体。为了改善聚合体(包埋块)的切割性能,还会在环氧树脂包埋配方中加入增塑剂,以调节包埋块的韧性。环氧树脂包埋剂对细胞微细结构有较好的保存性能,聚合后体积缩小较少,而且在真空中能经受较长时间的轰击。但它的操作不太方便,反差较弱。环氧树脂的型号较多,常用Epon812,Spurr树脂(ERL-4206)等。2.最常用的两种环氧树脂2.1Epon812包埋剂Epon812是一种进口树脂,它是一种

3、长链的脂肪族环氧化合物,是目前国际上普遍采用的一种优良包埋剂,粘度为150-210cP(在25℃条件下)。该包埋剂的配制方法甚多,但一般都按1961年Luft提出的配方进行。其配方如下:A液:Epon81262mlDDSA100mlB液:Epon812100mlMNA89ml上述配方若改变A液和B液的比例则可调节聚合块硬度,A液多则软,B液多则硬。通常冬天使用A:B=2:8(V/V);夏天使用A:B=1:9(V/V),可视组织的硬度和气候不同选择其比例。配制时可先分别配制A液和B液,然后将A液和B液按一定比

4、例混合后,再加入1%-2%的加速剂,边加边搅拌,使其充分混合。为了方便操作,也有人将Epon812,DDSA,MNA三种成分按一定比例直接混合使用。Epon812的聚合温度为:37℃过夜,60℃,24-36h。根据南方地区的气候条件,可用下列配方:Epon81251mlDDSA12mlMNA37mlDMP-301.8-2ml聚合条件:室温过夜,60℃,8-12h。DDSA是十二烷基琥珀酸酐(Dodecenylsuccinicanhydride)的简称。它是一种可得到软性包埋块的长链脂肪族分子。MNA是甲基内

5、次甲基二甲酸酐(MethylNadicanhydride)的简称,又称六甲酸酐,它有两个链环,能获得较硬的包埋块。DMP-30是2,4,6-三(二甲基氨基甲基)苯酚(2,4,6-Tris(dimethylaminomethyl)phenol)的简称。它能加速固化过程。2.2Spurr树脂(ERL-4206包埋剂)这是1969年由Spurr推荐使用的包埋剂,所以也称Spurr树脂。它含有两个环氧基,是一种低粘度(25℃时,7-10cP)的环氧树脂。由于具有粘度低的特点,所以近年来一些实验室已开始使用它。其配方

6、可按下表中各种成分的比例,即可获得不同性能的包埋块。其配方如下:Spurr树脂包埋剂配方成分(g)标准硬度硬软快速聚合配方缓慢聚合配方VCD10.010.010.010.010.0DER-7366.04.07.06.06.0NSA26.026.026.026.026.0DMAE0.40.40.41.00.2聚合时间70℃(h)888316混合时间(天)3-43-43-427VCD是二氧化乙烯环己烯(vinylcyclohexenedioxide)的简称。它的分子小,粘度低,聚合块硬度大。DER-736是di

7、glycidyletherofapolypropyleneglycol的简称。它属于脂肪族,分子小,有低粘度性质,可调节包埋块的硬度。NSA是nonenylsuccinicanhydride的简称。它是一种特殊的硬化剂,应避免暴露在潮湿的大气中,以防环氧或酐链的水解作用。DMAE是dimethylaminoethanol的简称。它是催化剂,增加催化剂的比例,可以缩短聚合的时间。Spurr树脂最终硬度可用DER-736的量来调节。配制时,先把前三种成分混合后,最后才加入DMAE,但从开始到混合完成,达到淡黄色

8、状态需3-7天。此包埋剂在70℃,一般8小时即可完全聚合,用陈旧的包埋剂时,则聚合时间会减少。因Spurr树脂嗜氧,聚合时不要加盖。包埋剂最好是用新鲜配制,但为了方便,可预先配制好保存在低温和防潮的环境中。Spurr树脂与Epon812树脂相比粘度低,操作方便,但毒性比Epon812树脂大,所以操作时要更加小心,此外,Spurr树脂各成分间的分子量大小差异较大,在组织中的渗透速度不一,容易个别成分造成渗透不均,而

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