牡丹切花开花衰老过程中mapk级联途径在aba和乙烯信号应答中的功能研究

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1、分类号UDC密级编号硕士学位论文牡丹切花开花衰老过程中MAPK级联途径在ABA和乙烯信号应答中的功能研究FunctionStudyofMitogen-activatedProteinKinaseCascadeinABAandEthyleneSignalResponseinCutTreePeonyFlowerduringBloosmingandSenescence学位申请人：苏笑林指导教师：史国安教授一级学科：生物学二级学科：细胞生物学学位类别：理学硕士2016年05月万方数据独创性声明本人声明，所呈交的论文是我个人在导师指导下完成的研究工作及取得的研究成果。据我所知，文

2、中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河南科技大学或其它教育机构的其他学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解河南科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校拥有对所有学位论文的复制权、传播权、汇编权及其它使用权（特殊情况需要保密的论文应提前说明，但在解密后应遵守此规定）。需要保密的论文请填写：本学位论文在年月至年月期间需要保密，解密后适用本授权书。（需要保密的学位论文无须向图书馆提供论文的电子文档）研

3、究生签名：导师签名：日期：万方数据摘要摘要牡丹（PaeoniasuffruticosaAndr.）是我国的传统名花，其花大色艳，深受国内外人民喜爱。但牡丹花期短、采后保鲜技术不过关等原因严重制约了其在切花市场的规模化发展。乙烯和ABA在牡丹鲜切花采后开花和衰老过程中起着重要的作用，但其作用机理还未明确。MAPK级联途径参与乙烯和ABA信号转导。因此，研究乙烯和ABA与MAPK级联途径在牡丹切花开放衰老中的作用模式及调节机理，具有重要的理论价值和实践意义。本研究以类似乙烯跃变型品种‘洛阳红’（‘Luoyanghong’）为试材，利-1-1用0.1mmol·LMAPK高效抑

4、制剂SB202190预处理12h后，再用1mmol·L-1CEPA和2mmol·LSTS溶液预处理30min，之后用蒸馏水进行瓶插试验，通过测定瓶插过程中的形态、生理生化指标和相关基因的表达，探索MAPK信号通路在切花开放和衰老过程中的生理和分子效应，分析MAPK级联途径如何参与乙烯和ABA信号传导，为牡丹切花保鲜提供依据。主要结果如下：（1）抑制剂SB202190预处理能够显著延长切花瓶插寿命和最佳观赏期，乙烯利能够解除SB202190预处理延缓切花衰老的效应；不同处理导致牡丹切花的衰老特征发生明显变化，对照的衰老特征为大部分花瓣和叶片失水萎蔫，并有少量落瓣，CK1和

5、STS为脱水萎蔫，CEPA为大量落瓣；抑制剂SB202190和硫代硫酸银处理后抑制花朵开放，维持花枝的鲜重，推迟了水分平衡值达到0值的时间，提高了观赏品质，对牡丹切花具有较好的保鲜效果；乙烯利处理后促进花朵开放，加速衰老进程，加速了水分平衡值达到0值的时间，不利于切花保鲜。（2）‘洛阳红’切花表现出乙烯和呼吸跃变特征，进一步表明‘洛阳红’为乙烯敏感型和呼吸跃变型花卉。抑制剂SB202190和STS可以减少牡丹切花的乙烯释放速率和呼吸消耗，推迟乙烯峰和呼吸峰的到来，且抑制剂STS与SB202190对于抑制乙烯释放和减小呼吸速率具有协同作用。乙烯利处理增加乙烯合成和呼吸消耗

6、，与SB202190对于抑制乙烯释放具有拮抗作用。抑制剂SB202190减少ACC含量、抑制ACS酶和ACO酶活性，说明MAPK级联参与调控乙烯的生物合成。（3）SB202190处理显著抑制PsMPK6基因的表达，乙烯利和硫代硫酸银诱导PsMPK6基因的表达，且乙烯利的诱导作用强于硫代硫酸银，说明切花体内的乙烯信号与MAPK级联途径之间关系比较复杂，推测乙烯利和硫代硫酸银可通过其他信号途径影响PsMPK6的表达。（4）SB202190在‘洛阳红’切花开放衰老期间对细胞膜完整性具有显著保I万方数据摘要_护作用，有助于延缓蛋白质降解，能有效的促进细胞内清除O2的酶系统，诱导

7、POD、SOD和CAT活性增加，硫代硫酸银预处理后作用叠加，说明MAPK级联能正向调节活性氧清除剂的产生。乙烯利预处理后则削弱，加速了牡丹切花开放和衰老的膜脂过氧化进程。（5）用PsUbiquitin作为内参基因，利用半定量RT-PCR分析关键基因的差异表达。与对照相比，SB202190抑制了PsACS和PsEIN3的表达；与CK1相比，乙烯利处理诱导PsACS和PsEIN3的表达，硫代硫酸银处理则在不同程度抑制；PsACS的表达水平由乙烯造成相似的表达模式，进一步说明ACS是乙烯合成的限速酶。SB202190推迟并降低了PsNCED表达